(22)--3.3.2吸附分离法的应用生物制药工艺学.docVIP

吸附分离法的应用 通过对吸附分离技术原理内容的分享，我们初步理解了吸附分离过程中存在的物理、化学现象并掌握了影响吸附效果的主要因素。接下来我们将结合几种常见的吸附剂，来看一下实际操作过程中吸附分离技术的应用。 常见的吸附剂根据其化学结构特点，可以分为有机吸附剂和无机吸附剂两大类。首先，我们来了解一下活性炭，活性炭是一种吸附能力很强的非极性吸附剂，一般为有机废料高温碳化而成，价格低廉，但吸附选择性差，对环境不友好。根据其粗细程度，活性炭可分为粉末活性炭和颗粒活性炭。其中粉末活性炭比表面积大，吸附能力强而颗粒活性炭比表面积小，吸附能力差，但便于填装，容易与溶液分离。活性炭的吸附作用在水溶液中最强在有机溶液中较弱，而且在酸性条件下吸附能力较强，而在PH6.8以上时吸附能力较弱。一般的说，活性炭对具有极性基团的化合物吸附能力较大，对芳香族化合物的吸附能力大于脂肪族化合物，对分子量大的化合物的吸附力较大。由于活性炭是一种强吸附剂，对气体的吸附力和吸附量都很大，所以，在20世纪20年代，活性炭被视为万能吸附剂，在第1次世界大战中，活性炭颗粒，被大量应用于防毒面具。目前活性炭多被用于防尘口罩，空气净化，家具去异味，汽车除味等用途除了用于除杂外，活性炭还可用于生化药物的分离，例如，766型颗粒活性炭吸附力辅酶a：首先，将酵母破壁后的提取液，流经766型颗粒活性炭，支付完毕后，用自来水冲洗至出液澄清，再用40%乙醇洗涤，然后改用3.23%乙醇洗脱，当出现微黄开始收集，最后进行浓缩得到辅酶a。 人造沸石是人工合成的一种无机阳离子交换剂，其分子式如图所示，由偏铝酸钠与二氧化硅形成水合物的模式存在。 在溶液中，偏铝酸根与二氧化硅和水形成不溶于水的骨架，以Na2M代表沸石，M+代表溶液中阳离子，则会出现以下反应，保持骨架不变，利用沸石中的钠离子置换溶液中的阳离子，从而达到吸附的目的。 人造沸石的这种吸附特点被利用在吸附细胞色素c的过程当中。首先将心绞碎用稀硫酸提取，清液用氨水中和至PH6.0，等电点沉淀法除杂蛋白，上清液中加入人造沸石搅拌吸附，静止后取出人造沸石，分别用蒸馏水，0.2%氯化钠溶液，蒸馏水洗涤直至洗液澄清，过滤抽干。将人造沸石装柱，用25%硫酸氨溶液洗脱，洗出液变红时开始收集，至红色流尽洗脱完毕，合并洗脱液，盐析，精致，得到细胞素c 磷酸钙凝胶是指一系列含有磷酸根和钙离子的凝胶化合物，根据制备方法不同，磷酸钙凝胶，可制成多种形式，如磷酸钙，磷酸氢钙，羟基磷灰石，在蛋白质的分离精制中，常被作为吸附剂使用，一般认为磷酸钙对蛋白质的吸附作用主要是其中钙离子与蛋白质负电基团结合引起的。实际应用中通常采用浓磷酸直接加入氢氧化钙溶液中，或者用磷酸盐溶液，加入氯化钙溶液，生成磷酸钙凝胶，吸附沉淀蛋白质。 这种方法被使用在胰岛素纯化过程中：首先将胰脏搅碎，立即用含磷酸醇液提取，过滤，将提取液中加入氯化钙溶液，利用生成的磷酸钙凝胶，将胰岛素吸附，然后用酸水解吸，进一步盐析精致。 活性氧化铝是最常用的一种吸附剂，存在碱性，中性和酸性之分，碱性氧化铝由氢氧化铝经高温脱水制得，中性氧化铝由层析用碱性氧化铝加水不断搅拌，煮沸，活化后得到，酸性氧化铝工业氧化铝用水调制后加入盐酸，经过刚果红酸性反应后，加热活化得到。氧化铝的活性与含水量关系很大，在一定温度下除去水分后可以使氧化铝活化，活化后的氧化铝，再加入一定量的水，既可降低活性。此类吸附剂特别适用于亲脂性成分的吸附分离，广泛的应用在醇，酚，生物碱染料，甾体化合物，苷类，氨基酸，蛋白质以及维生素，抗生素等物质的分离过程中。在维生素b12的纯化过程中，就使用到了活性氧化铝作为吸附剂：将浓缩的维生素b12溶液，加入到氧化铝吸附柱中进行吸附，然后用80%的丙酮水溶液进行洗脱，洗脱液冷却结晶后得到维生素b12。活性氧化铝价格低廉，再生容易，活性易控制，但操作不便，处理量有限，因此限制了在工业生产上大规模应用。 硅胶是一类具有多孔性网状结构的二氧化硅水合物，如图所示，硅胶骨架表面有很多硅羟基，能吸附水分子，这些水分子以游离态存在，称为自由水。 硅胶的活性随着自由水含量的增加而降低，常被用于芳香类，固醇类，磷脂类，脂肪类，氨基酸等物质的吸附分离。在辅酶q10的纯化过程中也使用了硅胶作为吸附剂：猪心残渣经过皂化，提取，浓缩等步骤得到浓缩液，经过硅胶柱吸附，乙醚-石油醚洗脱，得到的洗脱液在乙醇中结晶即可得到辅酶q10。 大孔网状聚合物吸附剂也称为大网格吸附剂、大孔网状树脂，是在树脂聚合时加入惰性的致孔剂，待网格骨架固化和链结构单元形成后，用溶剂萃取或蒸馏水洗将致孔剂去掉，形成不受外界环境条件影响的孔隙，其孔径远大于2～4nm，可达100nm，故称“大孔”，其性质与活性炭、硅胶等吸附剂相似。相比于活性炭、硅胶等传统吸附剂，大孔网状聚合