文献解读：牛磺酸通过增强CD8+T细胞的功能从而增强抗肿瘤免疫力.docxVIP

— — PAGE 1 — 文献解读：牛磺酸通过增强CD8+T细胞的功能从而增强抗肿瘤免疫力  文章标题：Taurine enhances theantitumor efficacy ofPD-1 antibody byboostingCD8+T cell function 发表期刊：Cancer Immunology, Immunotherapy影响因子：6.63作者单位：郑州大学第一附属医院百趣生物提供服务：发现代谢组学Classic-亲水版研究背景CD8+T细胞的功能状态决定了PD-1阻断抗体在肿瘤中的治疗效果。氨基酸是维持T细胞抗肿瘤免疫的关键营养物质。牛磺酸作为动物体内的一种含硫氨基酸，以游离形式存在，并且不参与蛋白质合成。 ，虽然牛磺酸已被证明可以影响T细胞的多种特性，如促进T细胞和B细胞的增殖、减弱T细胞的凋亡并增强T细胞的免疫功能等，但是，牛磺酸如何调节T细胞功能的潜在机制以及牛磺酸与PD-1阻断抗体治疗之间的相关性目前尚不清楚。在本研究中，通过超高效液相色谱-质谱法揭示了接受PD-1阻断抗体治疗的肺癌患者血清中显著改变的氨基酸种类，并通过结合RNA测序和体外实验的方法研究了其中的潜在机制与原理。本研究可为增强PD-1阻断抗体的抗肿瘤活性提供新的见解。 材料和方法临床样本根据接受化疗加PD-1阻断抗体治疗的肺腺癌(lung adenocarcinoma, LUAD)患者的临床反应，受试者被分为反应组(R)（n=15）和无反应组(NR)（n=5）。在后续的研究中使用了来自患者和健康献血者的外周血样本。小鼠肿瘤模型雌性C57BL/6小鼠（6-8周龄）和BALB/c小鼠（6-8周龄），所有小鼠均被饲养在特定的无菌条件下。将B16（小鼠恶性黑色素瘤细胞系）和4T1（小鼠乳腺癌细胞系）肿瘤细胞（2105）注射到每只小鼠的右腹皮下。每2天或3天记录一次肿瘤体积。PD-1或CTLA-4阻断抗体每3天使用一次。实验结果1.对PD-1阻断抗体治疗有反应的肺癌患者中牛磺酸水平升高根据代谢组学的分析，R组患者的两种氨基酸（牛磺酸和甲基组氨酸）水平相对较高，而牛磺酸的增幅最大。 ，研究结果表明，差异氨基酸可能参与调节T细胞免疫，并且发现R组的CD8+T细胞比NR组产生更多的细胞毒性细胞因子（IFN-和TNF-）。 2.牛磺酸增强了T细胞的抗肿瘤免疫力在添加不同浓度的牛磺酸培养CD8+T细胞的实验中，发现添加60M牛磺酸培养后，CD8+T细胞数量显著增加，而添加30M和120M牛磺酸培养后，不影响CD8+T细胞数量。 ，同时，研究发现经牛磺酸处理后，凋亡T细胞（Annexin+CD8+T细胞）的比例明显下降。而用牛磺酸培养的CD8+T细胞明显释放出更多的IFN-和TNF-。这些结果证实了牛磺酸增强了T细胞的增殖和功能。 3.SLC6A6与T细胞活化相关对牛磺酸合成酶（CSAD和CDO1）和牛磺酸转运体SLC6A6的研究，表明癌症患者的T细胞主要依赖转运体SLC6A6获得外源性牛磺酸。而通过基因表达谱交互分析（Gene expression profile interaction analysis, GEPIA）（图3），本研究推测SLC6A6是牛磺酸对T细胞抗肿瘤作用的必要条件。 4.SLC6A6基因敲除降低了T细胞的抗肿瘤免疫力利用基因敲除实验和RNA测序分析， ，本研究证实了SLC6A6基因敲除降低了T细胞的抗肿瘤免疫力（图4），并且降低了T细胞氧化磷酸化水平（图5）以及PLC1磷酸化，同时也抑制了钙信号通路以及MAPK信号通路（图6）。5.补充牛磺酸可改善免疫检查点阻断抗体治疗的治疗效果小鼠B16肿瘤模型实验结果表明，牛磺酸+PD-1阻断的小鼠肿瘤生长明显减弱，T细胞增殖标志物Ki67的表达显著上调。小鼠4T1肿瘤模型验证实验结果与小鼠B16肿瘤模型结果一致，牛磺酸单独使用IFN-的分泌量大于PD-1阻断抗体治疗，牛磺酸+PD-1阻断治疗未进一步增强IFN-的分泌量，而TNF-的分泌量在牛磺酸+ PD-1阻断治疗后显著增强。 ，同时，牛磺酸+PD-1阻断治疗也增加了CD8+T细胞中Ki67的表达。另外，牛磺酸+CTLA-4阻断剂联合治疗可减缓B16肿瘤模型的肿瘤生长，增加T细胞的细胞毒性细胞因子（IFN-和TNF-）节和CD8+T细胞中Ki67的表达。综上所述，补充牛磺酸可以提高T细胞的抗肿瘤反应，提高免疫检查点阻断抗体治疗的治疗效果。 结论 通过质谱分析，本研究确定了氨基酸牛磺酸在R组患者中的高表达，证实了牛磺酸可以增强CD8+T细胞的增殖和体外功能。随后的研究中发现，癌症患者CD8+T细胞在摄取牛磺酸时表达了高水平的SLC6A6，而在SLC6A