发育生物学实验.pptxVIP

发育生物学实验;方法一、 垂体激素对蛙 卵巢的作用;目的要求 观察促性腺激素对蛙卵巢活动的作用 ;基本原理  垂体前叶分泌促性腺激素，能调节雌性机体的卵巢周期性活动。虽然两栖类的正常排卵是有季节性的，但也可以通过体外注射垂体激素而刺激其排卵。;动物与器材成熟的雌蛙或蟾蜍;2m1注射器2只;500ml烧杯;垂体提取液;任氏液;;方法与步骤1、用注射器将1ml垂体提取 物从蛙的皮下注入腹腔， 记上“实验”标签。2、取另一只蛙，注入lml任 氏液，记上“对照”标签。; 3．放置约90min后，检查每只蛙的泄殖腔内是否有卵子。检查方法是用手握蛙，利用其腹部外翻压力，使输卵管内少量卵被推出，在泄殖腔的开口处便可见到。如没有见到卵子，可以再放些时间再观察。; 注意事项 实验蛙和对照蛙注射药液及任氏液时，注入的部位及容量要相同。;思考题 垂体前叶分泌何种与性腺有关的激素？有什么生理作用??;方法二、孕妇尿对蛙精巢和卵巢的作用;目的要求观察孕妇尿中人绒毛膜促性腺激素对蛙精巢和卵巢的作用。;基本原理 人绒毛膜促性腺激素hCG由合体滋养层细胞合成分泌，其合成活动受细胞滋养层产生的黄体生成素释放因子所控制，hCG在妊娠第2周开始分泌，第8周达高峰，第12周以后逐渐下降。; hCG与垂体促性腺激素的功能相似，有促进卵巢成熟、排卵、黄体形成与生长，促使雄性动物排精等作用，其主要功能是延长黄体的寿命，维持妊娠黄体，并使雌激素和孕激素的合成由卵巢顺利地过渡到胎盘。; 由于hCG具有促进性腺活动的作用，且在妊娠早期开始分泌，月经过期15天左右，孕妇尿中已含有足量的hCG，临床上即利用这些特点来作早期妊娠诊断。;方法与步骤①蟾蜍试验将受试尿注入雌蟾蜍背部皮下，8—16小时后蟾蜍排卵为阳性。;②雄蛙试验将受试尿注入雄蛙腹部或背部皮下，2-4小时后，从其穴肛取出尿液，显微镜下观察有精虫者为阳性。③可注射生理盐水为对照。;方法三绒毛膜促性腺激素对蛙卵巢、精巢的作用;目的要求观察绒毛膜促性腺激素制剂对蛙卵巢、精巢的作用、精子的形态、活动、精原细胞分裂、精子的变态。;基本原理同方法二;方法与步骤提示：①腹部皮下注射。②人的注射量为5000-10000个单位，现试剂为200个单位/ml,用量？;③生理盐水对照。④2-4小时镜下观察精子的活动状态及发育情况并记录描述。⑤排卵排精的时间？;思考题1、说明实验原理及选择实 验方法的依据。2、记录实验过程，描述实 验结果。3、简述实验体会。;附：蟾蜍性别鉴定方法（3种） 1、蟾蜍性别的鉴定主要靠前肢2-4趾侧部的黑疣，此为黑色的色素突起，雄性蟾蜍有此黑疣，雌体无。雄性生殖季节在前肢第4趾下方有类似的椭圆形抱雌疣。;2、雄性有鸣囊，可鸣叫， 雌蛙则无。3、把动物提起，前肢作环 抱状者为雄性，前肢呈 垂直状者为雌性。;二、两栖类早期胚胎发育 （设计）;方法一青蛙的早期胚胎发育;目的要求 观察青蛙的早期胚胎发育;基本原理 蛙卵是观察两栖类早期胚胎发育的好材料。青蛙一般早上6时产卵，随即受精，2小时后即分裂为2细胞期，以后每隔1-1.5小时分裂一次，依次经过2、4，8、16．32，64……个细胞期，到下午已达胚囊期。;方法与步骤青蛙排卵季节，携带长柄铁勺，水桶、10%福尔马林及玻璃小瓶若干，在早上5点半——6点到达蛙卵采集地。;如见雌蛙产卵，即用铁勺轻轻捞取新鲜卵于水桶中（水和草用原地的）如未见产卵，可捞取胶膜清新透明，动植物极黑白分明的新鲜卵团。并迅速用10%福尔马林固定一些新鲜卵于小瓶中。;按固定顺序，用吸管吸取卵于载玻片上，于双目解剖镜下(或显微镜低倍下)观察蛙卵的发育时期。 如蛙卵上有尘土，可将蛙卵吸到手心里，用解剖针压破胶膜，并在手心里来回拨动几次，使胶膜与卵分离。然后用吸管将卵吸回载玻片上观察。;方法二蟾蜍的早期胚胎发育;基本原理原理同上 方法与步骤用绒毛膜促性腺激素的方法使卵受精。镜下观察卵裂至囊胚的发育过程。并加以描述。;三、两栖类的变态发育 （设计）;方法一蛙的变态发育;目的要求观察蛙的变态发育过程，明确激素对变态发育的影响。;基本原理蝌蚪和蛙成体的差别很大，蝌蚪生长在水中，用鳃呼吸，无四肢，有尾；蛙则可以生活在陆地，用肺呼吸，有四肢、无尾。这些形态上的改革又是集中在短时期内完成的，称为变态发育。;方法与步骤①从池塘捉一些蝌蚪并将它们带回实验室。②将养鱼缸装满池塘水，并铺入一些石头和水草。; 蛙的变态发育过程孵化后时间 主要形态特点 生态特点