短期、亚慢性和慢性毒性.pptVIP

4. 确定不同动物对受试物的毒效应的差异，为将研究结果外推到人提供依据。 3. 研究重复接触受试物毒性作用的剂量-反应 （效应）关系，从初步了解到确定未观察到有害作用 的剂量（NOAEL）和观察到有害作用的最小剂量 （LOAEL），为制定人类接触的安全限量提供参考值 二、研究方法 （一）实验设计 1 实验动物选择 （1）物种和品系 急性原则： * 尽量选择急性毒性反应与人近似的动物； * 易于饲养管理、试验操作方便的动物； * 繁殖生育能力较强，数量较大能够保障供应； * 价格较低，易与获得的动物。 亚慢性原则： * 理论上，选取对化学毒物代谢过程、生理反应和生化特性基本上与人接近，且在急性试验中证明是对化学毒物敏感的物种和品系 实际上，常用大鼠 犬 豚鼠 （2）性别、年龄和数量 雌雄各半； 刚断乳的动物：大鼠6－8周龄（80-100g），同组动物体重不超过10%、组间平均体重不超过5% 大鼠、小鼠每组不少于20只，犬、猴不少于6只，要求试验结束时，活的动物数能保证统计学处理。 亚慢性毒性试验 年龄：大鼠80~100g 狗 8~12月 小鼠10~15g 数量：小动物≥20 大动物≥6 性别：雌雄各半 慢性毒性试验 年龄：大鼠 50~70g 狗 8月 小鼠 初断乳 数量：小动物≥40 大动物≥8 性别：雌雄各半 （3）微生物学寄生虫学等级和饲养环境 应选择清洁级及以上等级动物 动物室：清洁、温度22oC±3，湿度30-70%，人工控制昼夜交替 笼具：大小适中、动物能自由活动 饲料：营养合理 饮用水：清洁、充足 2 染毒方式与期限 染毒方式原则： 1）尽量选用与人群实际接触相同的途径和方式 食品、药品、环境污染物 2）并与预期进行慢性毒性试验的接触途径一致。 一般以经口、经呼吸道和经皮肤三种途径 染毒，每日一次，连续给予 染毒期限 取决于实验具体要求和所选择的实验动物 工业毒理学—— 3－6个月 食品毒理学—— 6个月－1年 环境毒理学—— 6个月－1年 致癌试验—— 接近或等于动物的预期寿命 注意的问题： （1）小动物：灌胃或喂饲法 大动物：胶囊法或灌胃法 喂饲法注意： 混合均匀 受试物稳定 保证营养 受试物掺入量严格规定 （2）呼吸道染毒 染毒时间：2-6h/d 亚慢性：4小时 慢性试验： 间歇性：工业毒物 6-8小时 连续性：环境接触 22-24小时 （3）注射 （4）最好结合毒物动力学血药浓度的监测， 以保持生物学效应的每日相似性 3 剂量选择和分组 （1）分组： 原则：一般设3个试验组和1个阴性（溶剂）对照组。 最高剂量组：要求出现明显的中毒症状或某些观察指标发生明显变化，但动物不死亡，即使有死亡，不超过10% 最低剂量组：应无中毒反应或极轻微反应（ NOAEL)。 中剂量组相：当于观察到有害作用的最低剂量(LOAEL) 高、中、低剂量组距以3－10倍为宜，不少于2倍 （2） 剂量设计： ①以相同物种的短期毒性资料为依据。 亚慢性毒性试验可依据急性毒性的阈剂量或以1/20～1/5LD50确定； 慢性毒性试验以亚慢性毒性试验效应的最大耐受量（MTD）为最高剂量。 剂量选择步骤： 急性 亚急性 亚慢性 慢性 ②对于人群主动摄入的食品和药品，可采用人 体可能接触的最高剂量为剂量设计依据 大 鼠： 3个剂量组：10 30 100 非啮齿类： 3个剂量组：5 15 50 根据专业特殊性和管理部门有所区别 亚慢性毒性的剂量选择 阴性对照组 低剂量组 中剂量组 高剂量组 急性毒性的阈剂量 1/20~1/5 LD50 组距：3~10倍，最低不小于2倍 慢性毒性的剂量选择 阴性对照组 低剂量组 中