生化RNA的生物合成.pptxVIP

生化RNA的生物合成;2.特点： 模板——DNA的一条链 模板链：DNA双链中作为转录模板的单股链，其核苷酸序列与RNA互补。（ 反 义 链，负链， Watson链） 编码链：与转录的RNA碱基序列一致的DNA单链，只是T 换成U。（ 有 义 链 ，正链， Crick链） 原料——NTP 配对原则—— dT-A,dA-U,dG-C,dC-G 酶——RNA聚合酶,无校正功能 不需要引物 合成方向—— 5→3 ;只针对已确定的某一基因而言;不对称转录 （1）在DNA双链中，一条链可转录，另一条链不转录 （2）模板链并非永远在同一DNA单链上。 基因有选择地转录; 复制 转录 两股链均复制 模板链转录 dNTP NTP A-T;G-C A-U; G-C DNA聚合酶 RNA聚合酶 半保留复制 mRNA,tRNA,rRNA等 的DNA ;3. 关于DNA指导的RNA聚合酶——DDRP RNA聚合酶的特点; a. 不需要引物 b. 双链DNA做模板活性最强 c. 第一个掺入的NTP常为GTP或ATP,转录期间保持完整不产生PPi. d. 转录中有一短暂的DNA-RNA杂交双链,很快解开 e. 聚合方向 5′→ 3′;第8页/共50页;(二) 原核细胞的转录;第10页/共50页;RNA的转录过程：（以大肠杆菌为例） 起始位点的识别 转录起始 链的延长 转录终止;第12页/共50页;（1）起始位点的识别;第14页/共50页;（2）转录起始;第16页/共50页;（3）RNA链的延长;第18页/共50页;第19页/共50页;（4）转录终止;第21页/共50页;第22页/共50页;终止方式: 不依赖ρ因子的转录终止(简单终止子或强终止子) 特点： 1 ）在终止点之前具有一段富含G-C的回文区域。2）富含G-C的区域之后是一连串的dA碱基序列，它们转录的RNA链的末端为一连串U（连续6个）。可能提供信号使酶脱离模板;第24页/共50页;b. 依赖ρ 因子的转录终止(弱终止子) ------必需ρ因子存在时才能发生终止作用. 特点: 终止子后无连续的A，无回文区域或回文区域短,回文结构不含富有G-C区. 在ρ因子作用下，ATP酶水解，释放能量，使新生RNA与模板脱落。具有RNA-DNA解螺旋酶活力.;第26页/共50页;识别终止子需要一些特殊的辅助因子,其中Nus A 因子可提高终止效率,促进RNA聚合酶在终止子位置上的停顿. Nus A 可与RNA聚合酶的核心酶结合, 形成a2 bb’Nus A复合物, s 可取代Nus A ,形成a2 bb’ s. 转录终止时, Nus A结合到核心酶上,由Nus A识别终止子序列. 转录终止后, RNA聚合酶脱离模板, Nus A又被s取代, 由此形成RNA聚合酶起始复合物和终止复合物循环.;有些终止子的作用可被特异的因子所阻止，使酶得以越过终止子继续转录，称为通读（ readthrough）;;灯刷染色体 ;（四）转录过程的选择性抑制; 利福平是原核细胞RNA聚合酶的抑制剂。 利福平与原核生物RNA聚合酶?亚基结合，抑制转录过程中RNA链的延长反应,但并不抑制真核生物RNA的合成。类似的抑制剂尚有利链霉素。; α-鹅膏蕈碱是真核细胞RNA聚合酶的抑制剂。 它是通过真核细胞RNA聚合酶Ⅱ,阻断细胞核的mRNA合成,但对原核细胞的RNA合成无影响.;(五) 转录产物的“加工”;四膜虫rRNA前体自我剪接机制－L19RNA的形成; 2、tRNA前体的加工： 原核与真核生物的tRNA转录后都需要加工，包括： (1)由核酸内切酶切除前体上3?和5?端上多余的核苷酸; (2)由核酸外切酶逐个在3?切去附加序列，进行修剪。 (3)3?端添加CCAOH序列，由核苷酰转移酶催化。 （接受活化的AA） (4)对核苷的一些特定的碱基和戊糖进行修饰。 ;第37页/共50页;3. 真核细胞mRNA的加工; (1) 5′ -端加帽;(2) 3′加尾(tailing) 特异核酸内切酶 多聚A 聚合酶 ;(3) 切除内含子(intron cleavage ) snRNA(核内小RNA)参与切除内含子。 snRNA的功能类似一个暂时的模板,它使两个外显子转录的RNA片段的末端靠在一起,为正确位点拼接作准备,一个拼接错误可使mRN