兰州大学《分子生物学》课件-第8章原核生物基因表达调控.pptxVIP

第八章 原核生物基因表达调控 ;2. 你认为基因表达有无规律性？;一、 基因表达的规律——时间性和空间性;;2、空间特异性(spatial specificity); 组成性表达(constitutive expression) 适应性表达(adaptive expression）; 1、组成性表达： ; 2、适应性表达 指环境的变化容易使其表达水平变动的基因表达方式。 应环境条件变化基因表达水平增高的现象称为诱导(induction)，这类基因被称为可诱导的基因(inducible gene)； 相反，随环境条件变化而基因表达水平降低的现象称为阻遏(repression)，相应的基因被称为可阻遏的基因(repressible gene)。 ; 原核细胞的蛋白质数量的不均衡性 组成性合成蛋白质（constitutive）：数量大 适应性或调节性（adaptive regulatory）：数量变化大 Eg. 一个大肠杆菌细胞中约有2500-3000个基因。估计正常情况下，可带有107个蛋白质，平均每个基因产生3000多个蛋白质分子，但是基因产物不平均。 其中：核糖体蛋白约有15,000-30,000个核糖体×50种，数量很惊人。而半乳糖苷酶等诱导酶，其含量可少至每细胞仅1-5个分子，多时可达几千个分子。;基因表达的规律性是通过什么途径来实现的呢？; ? mRNA加工成熟水平上的调控 ? 翻译水平上的调控 ;基因表达的层次;1.生物体生存所必需 的； 适应环境、维持生长和增殖（原核、真核）;3、研究意义：一把揭示生物学奥妙的金钥匙。 ;三、经典原核表达调控模式——操纵子;现象： 大肠杆菌可以利用葡萄糖、乳糖、麦芽糖、阿拉伯糖等作为碳源而生长繁殖。但是，当培养基中有葡萄糖和乳糖时，细菌优先使用葡萄糖； 当葡萄糖耗尽，细菌停止生长，经过短时间的适应，就能利用乳糖，细菌继续繁殖增长。;β－半乳糖苷酶的作用;3. 乳糖和葡萄糖同时存在时，β-半乳糖苷酶的含量并不增加。;结论;诱导： 诱导细胞产生诱导酶的过程叫诱导。 ;问题一：为什么在葡萄糖和乳糖共 同存在时，细菌只利用葡萄糖？;;;; ; ;思考题;? 当大肠杆菌在没有乳糖的环境中生存时，1ac操纵元处于阻遏状态。 i基因在其自身的启动子Pi控制下，低水平、组成性表达产生阻遏蛋白R，每个细胞中仅维持约10个分子的阻遏蛋白。 R以四聚体形式与操纵子o结合，阻碍了RNA聚合酶与启动子P1ac的结合，阻止了基因的转录起动。R的阻遏作用不是绝对的，R与o偶尔解离，使细胞中还有极低水平的β－半乳糖苷酶及透过酶生成。 ;思考题;为什么葡萄糖存在时大肠杆菌不利用乳糖？;CRP (cyclic AMP receptor protein)是细菌中特异的cAMP受体蛋白， CRP本身是没有活性的，但是当CRP与cAMP结合形成cAMP－CRP复合物，称为CAP。 CAP为活化状态，能以二聚体的方式与启动子中特定的DNA序列CAP位点结合。; -1;;葡萄糖 降解产物 ;+ + + + 转录;可见，细菌中的cAMP含量与葡萄糖的分解代谢有关:;葡萄糖对 lac 操纵子的阻遏作用称分解代谢阻遏(catabolic repression)。 ;-5 -1＋1 ＋21;当阻遏蛋白封闭转录时，CAP对该系统不起作用；;如果某种物质能够促使细菌产生酶而本身又不被分解，这种物质被称为安慰诱导物： 如IPTG（异丙基- β –D-硫代半乳糖苷）是乳糖类似物，不受β－半乳糖苷酶的催化分解，却也能与R特异性结合，使R构象变化，诱导1ac操纵元的开放。 ;The Lac Operon:When Glucose Is Present But Not Lactose;The Lac Operon:When Lactose Is Present But Not Glucose;The Lac Operon:When Neither Lactose Nor Glucose Is Present;乳糖操纵子学说的主要内容：;（4）诱导物通过与阻遏物结合，改变其三维构象，使之不能与操纵区结合，使基因得以表达。这就是诱导过程。; (6）cAMP－CRP复合物与CAP区结合促进启动子的转录活性开启，使基因得到表达。;?(三) 操纵子学说的提出 Jacob Monod(法 ) 1961年根据对lac Z,Y,A基因突变体的研究提出来的，是关于原核生物基因结构及其表达调控的学说。;操纵子（ope