兰州大学《分子生物学》课件-第3章原核生物和真核生物的染色体.pptxVIP

第三章 原核生物和真核生物的染色体; DNA molecules are the largest macromolecules in the cell and are commonly packaged into structures called “chromosomes”, most bacteria viruses have a single chromosome where as Eukaryotic cells usually contain many. ; 任何一条染色体上都带有许多基因，例如：一条高等生物的染色体上可能带有成千上万个基因。 如果设想将人体细胞中的DNA分子绕地球一周，那么，每个碱基大约只占1－5厘米，而一个2－3kb的基因只相当于地球上一条数十米长，数厘米宽的线段！;;（三）染色质和核小体 现象： 染色质DNA的Tm值比自由DNA高； 在染色质状态下，由DNA聚合酶和RNA聚合酶催化的DNA复制和转录活性大大低于在自由DNA中的反应； DNA酶I（DNaseI）对染色质DNA的消化远远慢于对纯DNA的作用。 染色质的电子显微镜图显示出由核小体组成的念珠状结构，可以看到由一条细丝连接着的一连串直径为10nm的球状体。 推论：染色质中DNA极可能与蛋白质分子相互作用。; A highly organized complex of DNA and protein （ 50% ）(nucleoprotein complex), which makes up the eukaryotic chromatin. The nucleoprotein complex was named Nucleosome（核小体）.;3.1 核小体(nucleosome);核小体是由组蛋白核心和DNA组成的。 组蛋白是与DNA相互作用的一类碱性蛋白质的总称，包括H1 、H2A、H2B、H3和H4五种。 核小体的结构是由H2A、H2B、H3、H4各两个分子生成的八聚体和由大约200bpDNA组成的——八聚体在中间，DNA分子盘绕1.75圈，而H1则在核小体的外面，每个核小体只有一个H1。;染色质结构模型----串珠模型;Linker DNA 10 ～ 100 bp之间 average 55 bp; Solving the packing problem: The length of a chromosomal DNA can be up to several centimeters (cm), but the the diameter of nucleus is about 1-10 μm. (about 104-fold); 在核小体中DNA盘绕组蛋白八聚体核心，从而使分子收缩成1/7，200bpDNA的长度约为68nm，却被压缩在10nm的核小体中。;双链DNA;螺线管结构的横切面; 如: 人中期染色体中含3.3×109碱基对，其理论长度应是180cm，这么长的DNA被包含在46个51μm长的圆柱体（染色体）中，其压缩比约为104 。;3.3 染色体中的蛋白质—组蛋白和非组蛋白 组蛋白是染色体的结构蛋白，它与DNA组成核小体。通常可以??2mol/L NaCl或0.25 mol/L的HCl/H2SO4处理使组蛋白与DNA分开。 ;Four families of core histone: H2A, H2B, H3 and H4, and an additional histone H1 Small Molecularweight, 10 kDa for core histones and 23 kDa for H1. 这些组蛋白都含有大量的赖氨酸和精氨酸，其中H3、H4富含精氨酸，H1富含赖氨酸；H2A、H2B介于两者之间，能够与DNA紧密结合。;3.3.2 组蛋白的特点;组蛋白在进化上的极端保守性： 例如：牛、猪、大鼠的H4氨基酸序列完全相同。;组蛋白无组织特异性：到目前为止，仅发现鸟类、鱼类及两栖类红细胞染色体不含H1而带有H5，鱼类精细胞染色体的组蛋白是鱼精蛋白。 肽链上氨基酸分布的不对称性：碱性氨基酸集中分布在N端的半条链上。例如，N端的半条链上净电荷为+16，C端只有+3，大部分疏水基团都分布在C端。 组蛋白H5的特殊性：富含赖氨酸（24%）外还有Ala（16%），Ser（13%）及Arg（11%）;3.3.3 组蛋白的变体和修饰; 修饰作用在细胞周期特定时间可发生，包括甲基化、乙酰化、磷酸化和ADP核糖基化等。H3、H4修饰作用较普遍，H2B有乙酰化作用、H1有磷酸化作用。;组蛋白修饰的意义：;For example： Act