兰州大学《分子生物学》课件-第4章DNA损伤修复.pptVIP

光复活 DNA紫外线损伤的光复合酶修复 甲基转移酶使O6-甲基鸟嘌呤脱甲基生成鸟嘌呤，防止G-T配对 4.4 重组修复(Recombination Repair) 特点： 不能去掉错误，但是能够无限的稀释 修复部位：新合成链中，由于母链有未修复的损伤而在新链中形成的对应的缺口 先从同源DNA母链上将相应核苷酸序列片段移至子链缺口处，然后再用新合成的序列补上母链缺口 * DNA损伤的种类：碱基的脱落碱基（或核苷）的改变错误碱基掺入核苷酸的缺失或插入嘧啶碱基二聚体链的断裂DNA链的交联 第四章 DNA损伤修复 兰州大学《分子生物学》 DNA突变的类型 -T-C-G-G-C-T-G-T-A-C-G- -A-G-C-C-G-A-C-A-T-G-C- 转换 -T-C-G-A-G-C-T-G-T-A-C-G- -A-G-C-T-C-G-A-C-A-T-G-C- 插入 A -T-C-G-C-T-G-T-A-C-G- -A-G-C-G-A-C-A-T-G-C- 缺失 T 野生型基因 -T-C-G-A-C-T-G-T-A-C-G- -A-G-C-T-G-A-C-A-T-G-C- -T-C-G-T-C-T-G-T-A-C-G- -A-G-C-A-G-A-C-A-T-G-C- 颠换 碱基对的置换(substitution) 移码突变 (framesshift mutation) 4.1 复制修复系统： 4.2 损伤修复系统： 4.3 限制修饰系统 修复机制 错配修复 切除修复，直接修复， 重组修复， SOS修复 4.1 错配修复——通过一个酶系统修复正在复制的DNA链中的错配碱基，即切除尚未甲基化的子代链上的错配碱基. 属于校对活性吗？ 母链的识别？根据复制叉上DNA甲基化程度； 错配修复的甲基化依赖机制： ?Dam甲基化酶，使母链位于5’GATC序列中A的N6位甲基化，复制前完成，作为子链修正的依据； ? 子链甲基化在DNA复制之后进行； ?当子链中有错配碱基时，根据复制叉上DNA甲基化程度，修复系统在母链甲基化腺苷酸的上游鸟苷酸5’位置切除尚未甲基化的子链上的错配碱基，启动修复合成子链。 甲基化过程 甲基化部位 甲基化指导的错配修复过程 5’ 切割部位 p.52 发现错配碱基 在水解ATP的作用下，MutS， MutL与碱基错配点的DNA双链结合 MutS-MutL在DNA双链上移动，发现甲基化DNA后由MutH切开非甲基化的子链 碱基错配修复过程示意图 嘧啶二聚体的产生 嘧啶二聚体 的修复机制 切除修复 直接修复 重组修复 SOS修复 4.2 切除修复 一）碱基切除修复(Base Excision Repair，BER) 相关概念： Ap位点：糖苷水解酶识别改变了的碱基，把碱基从N-β-糖苷键处切下来，在DNA链上形成去嘌呤或去嘧啶位点，统称为AP位点。 Ap内切酶的作用： Ap内切酶切开受损伤的核 苷酸的磷酸二酯键，切除包括该 Ap 位点在内的一小段DNA. AP位点形成； Ap内切酶切开Ap位点附近的磷酸二酯键，除去包括Ap位点的一小段DNA； DNA Pol l 除去DNA链的损伤部分(5’--3’外切)并合成新链； 连接酶封闭。 碱基切除修复过程： AP位点 由AP磷酸内切酶将受损核甘酸的糖甘-磷酸键切开 。 DNA连接酶连接 利用DNA聚合酶I切除损伤部位，补上核苷酸 二）核苷酸切除修复 (Nucleotide Excision Repair，NER) ? 核苷酸切除修复系统的作用包括DNA切割酶、DNA聚合酶、DNA连接酶等系统的作用。 ? DNA切割酶（uvrABC核酸酶）能在已损伤的DNA核苷酸的5’和3’位分别切开磷酸二酯键，产生两个切口，之后移去含有损伤部位的DNA片段； DNA PolI填补缺口，连接酶封闭切口。 识别损伤部位 损伤的两边切除几个核苷酸 DNA 聚合酶以母链为模板复制合成新子链 DNA连接酶将切口补平 核苷酸的切除修复过程 （22＋6） （8＋4） uvrABC核酸酶的作用机制 4.3 直接修复（Direct repair） ：把损伤的碱基回复到原来状态的一种修复。 光复活（ photoreactivation ）：在DNA光解酶（photolyase）的作用下将环丁烷胸腺嘧啶二体和6-4光化物还原成为单体 *