兰州大学《分子生物学》课件-第6章生物信息的传递.pptxVIP

第六章 生物信息的传递 ——从DNA到RNA;● 基本概念 ● RNA聚合酶 ● RNA转录的基本过程 ● 原核生物与真核生物mRNA的特征比较 ● 内含子的剪切、编辑、再编码及化学修饰 ;一、基本概念;参与转录的分子;RNA的种类：;● 基本概念 ● RNA聚合酶 ● RNA转录的基本过程 ● 原核生物与真核生物mRNA的特征比较 ● 内含子的剪切、编辑、再编码及化学修饰 ;RNA聚合酶是催化RNA合成的大分子： RNA聚合酶 NTP+(NMP)n (NMP)n+1+PPi ;RNA聚合酶的反应条件; 2.2 原核生物中的RNA聚合酶 原核生物中由一种RNA聚合酶催化所有RNA (mRNA, rRNA和 tRNA)的合成。 核心酶： 2 ?，β；β’；ω亚基 RNA聚合酶全酶 σ亚基：启动子的识别 RNA聚合酶是目前已知的最大的酶之一。;;大肠杆菌RNA聚合酶的组成分析; 核心酶与DNA序列结合是随机的，平均结合常数是2×1011； 全酶因为包含σ亚基与特异序列（启动子）的结合能力提高，降低与随机序列结合的能力。 例如： T7噬菌体的全酶与随机序列平均结合常数是108-109，而与启动子结合常数是1012-1014 。平均提高了约106倍。;2.3 真核生物的RNA聚合酶;一、RNA聚合酶I的功能：细胞分裂间期，合成3种rRNA。 二、 RNA聚合酶Ⅱ的功能：合成各种mRNA和snRNA。 三、 RNA聚合酶Ⅲ的功能：合成前体 tRNA和 5S rRNA。;● 真核生物RNA聚合酶;eukaryotic RNA polymerases的活性; RNA聚合酶没有校对功能 可以吗？ 可以解释什么现象？;● 基本概念 ● RNA聚合酶 ● RNA转录的基本过程 ● 原核生物与真核生物mRNA的特征比较 ● 内含子的剪切、编辑、再编码及化学修饰 ;3、转录的基本过程;3.1.1 DNA 是RNA合成的模板： 模板链（反义链,非编码链, non-Coding Strand ）:将DNA链中根据碱基互补原则指导RNA合成的DNA链称为模板链。 非模板链 (正义链，编码链, Coding Strand)：与转录出来RNA顺序一致，但U代替了T。 ;模板链与非模板链;3.1.2转录的不对称性：;;?3.2.1 转录起点:与新生RNA链第一个核苷酸相对应DNA链上的碱基,即RNA聚合酶开始转录的位点，记做+1 ： 上游区 +1 下游区 Upstream Downstream ; 转录开始的部位记做+1，称为转录起始点，与复制起始点（ori）不同，ori为一个区域，转录起始点为一个碱基，与转录相同的方向为下游，标记为+1，+2，+3……，与转录相反的方向为上游，标记为-1，-2，-3…，注意没有0。 ;3.2.2启动子 是一段位于结构基因5’端上游区的DNA序列，能够活化RNA聚合酶，使之与模板DNA准确地相结合，并具有转录起始的特异性。 是RNA聚合酶起始RNA合成时特异结合的DNA序列.;● 启动子的发现——印迹法;T85T83G81A61C69A52;原核生物典型启动子的结构; ; ;（二）真核生物启动子;真核生物启动子的结构;1）核心启动子;2）上游启动子元件;TATA 区主要负责转录的精确启始，如果去掉，转录产物数量不会下降很多，但是启始位点各不相同，很多不具备生物活性；  GC区与 CAAT区等主要控制转录频率，基本不参与启始位点的确定，CAAT区对转录频率的贡献最大，该区任一碱基的改变都将极大的影响该基因的转录强度； GC区与 CAAT区无位置效应，当全部位于TATA区上游时，二者之间的距离（碱基数）对启动子的影响很大。;真核生物的基因并不是都具备上述元件，例如：SV40的早期基因没有TATA区和CAAT 区，都是有6个串联的GC区；组蛋白H2B基因，不含GC区，但是有两个CAAT，一个TATA区;SV40 早期启动子 组蛋白H2B ;3）真核顺式调控元件：增强子;增强子的作用特点：;（三） 转录的起始及起始复合物形成; 3.1 原核生物RNA合成转录的起始 RNA合成在启动子上起始包括：封闭复合物，开放复合物和三元复合物的形成。 RNA聚合酶含盖在起始点的