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- 2023-05-15 发布于陕西
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黄酮化合物的显色反应
显色反应黄酮类化合物多具,ph-OH和邻二ph-OH结构因此可产生此类结构的相应(还原及络合)反应,可用此鉴别不同结构黄酮类化合物。
1、盐酸-镁粉反应(Mg-HCl反应) 此反应是黄酮类化合物定性反应中常用法(首选法) 样品MeOH(EtOH)液 (1ml) 加少许Mg粉,浓HCl数滴,振摇 必要时水浴加热 红~紫红紫~蓝(少)或绿(少) 显色反应
槲皮素 花色苷元(红约20%) 双花色苷元(红80%以上) 机理 显色反应
盐酸-锌粉反应(Zn-HCl反应) 做法及阳性反应的结果同Mg-HCl反应。阳 黄酮醇3-O-糖苷二氢黄酮醇阴 黄酮醇二氢黄酮醇3-O-糖苷显色反应特点:可区别二氢黄酮及黄酮醇和二者的3-O-糖苷。
样品EtOH液 (1~2ml) Na—Hg数min或Δ过滤 滤液 HCl酸化 红黄~淡红棕黄色 黄酮,二氢黄酮,异黄酮,二氢异黄酮红黄酮醇二氢黄酮醇黄~淡红棕黄色显色反应2、钠汞齐还原反应(Na-Hg 还原反应)
此反应仅二氢黄酮类为阳性,其它均为阴性。 此反应为二氢黄酮类专属性反应 样品MeOH液 0.1ml(1~2mg) 等量2% MeOH液 紫~紫红 浓HCl或 紫~紫红 点样滤纸上 喷2% MeOH液,1min后,浓HCl气流薰显色反应3、四氢硼钠反应( 反应)
3-羟基,4-酮基及5-羟基,4-酮基结构黄酮类化合物均为阳性结果,邻二ph-OH结构者也为阳性,但在酸性条件下不稳定。黄色( =415nm ,定量)黄色荧光(4’-羟基黄酮醇,7,4’-二羟基黄酮醇为天蓝色荧光) 试管、聚酰胺及硅胶TLC和PC样品1% 或 水或醇液显色反应4、铝盐反应
样品醇液黄~橙黄~褐荧光 黄酮(醇) 异黄酮 天蓝色荧光 二氢黄酮(醇) 点样于滤纸片上、加热至干 1% 甲醇液显色反应5、反应
样品水(醇)液 黄红沉淀 (邻二ph-OH)中性醋酸铅黄红沉淀 (邻二ph-OH, 一般ph-OH)碱式醋酸铅 此反应可鉴别这二种结构的黄酮,亦可分离这两种结构的黄酮及其苷。 显色反应6、铅盐沉淀反应
此反应也可在滤纸上进行(黄绿及黄绿荧光) 二氯氧锆可与3-OH,4-酮基或5-OH,4-酮基黄酮络合,但稳定性不一样。 2% MeOH液 样 品 (甲醇液) 黄色不褪(3-OH) 黄色减褪(5-OH) 2%枸橼酸甲醇液 黄色2%枸橼酸甲醇液 显色反应7、锆盐——枸橼酸反应
具有邻二酚羟基黄酮有此反应 0.01mol/L 甲醇液3滴 样品 氨气饱和甲醇液 3滴 绿~棕~黑 ↓ + 2. 显色反应8、氨性氯化锶反应
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