基因工程专题.pptxVIP

基因工程专题;目的基因（主要指编码蛋白质的基因）的获取的常用的方法：（1）从基因文库中获取目的基因： ①直接从生物体中提取总DNA，构建基因组文库，从中调用目的基因；②以mRNA为模板，反转录合成互补的cDNA片段,构建cDNA文库，从cDNA文库中获取目的基因； （2）利用聚合酶链式反应（PCR）特异性地扩增所需要的目的基因片段； （3）如果基因比较小，基因序列已知，通过化学合成仪用化学方法直接人工合成。;基因文库的构建------细胞内总DNA的提取和分离程序;基因文库的构建-----将总DNA包含的基因组各片段分别克隆在质粒或噬菌体运载体上，便构成了该生物的基因文库。 ;1.怎样从基因文库中获取所需的目的基因呢？;第6页/共19页;从基因组文库中获取目的基因存在的问题;利用反转录人工合成互补DNA?构建的cDNA文库中提取目的基因------获取的DNA片段往往是具有特定功能的目的基因??;基因组文库：某种生物的基因组的全部遗传遗传信息通过克隆载体贮存在一个受体菌的群体之中，这个群体即为这种生物的基因组文库。若这个群体只贮存某种生物的基因组的部分遗传信息，则称为部分基因组文库。 cDNA基因文库：某种生物基因组转录的部分或全部mRNA经过逆转录产生的各种cDNA片断分别与克隆载体重组，贮存在一群受体菌群体中，这样的群体称为cDNA基因文库。;2.利用PCR技术扩增目