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第五章 发酵工艺过程控制 第一节 发酵的操作方式第二节 温度变化及其控制第三节 pH变化及其控制第四节 溶解氧及其控制第五节 泡沫对发酵的影响及控制第六节 发酵染菌及其防治第七节 发酵终点的判断工艺条件控制的目的：就是要为生产菌创造一个最适的环境，使我们所需要的代谢活动得以最充分的表达。第一节 发酵的操作方式分批发酵补料分批发酵（半连续发酵）连续发酵一、 分批发酵 （batch culture or fermentation）1.概念： 向反应器中一次投入所需的培养基，然后接种培养，培养过程中除控制温度和pH外（O2和CO2及消泡剂除外）不进行其他任何控制，反应结束后将全部培养液排出进行处理。迟滞期对数生长期稳定期死亡期分批培养中微生物的生长延滞期（迟滞期）：把微生物从一种培养基中转接到另一培养基的最初一段时间里，尽管微生物细胞的重量（W﹠V)有所增加，但细胞的数量没有增加。指数生长期：如以细胞数目或生物量的对数对时间作一对数图，将得一直线，因而这一时期称作指数生长期。对细菌、酵母等单细胞微生物来讲，单位时间内其细胞数目将成倍增加。对于丝状微生物而言，单位时间内其生物量将加倍。稳定期：培养基中的底物不断被消耗，一些对微生物生长代谢有害的物质在不断积累，微生物的生长速率和比生长速率逐渐下降，直至完全停止，这时就进入稳定期。生物量增加十分缓慢或基本不变；微生物细胞的代谢还在旺盛地进行着，细胞的组成物质还在不断变化。死亡期：细胞的营养物质和能源储备已消耗殆尽，不能再维持细胞的生长和代谢，细胞开始死亡。微生物细胞的死亡呈指数比率增加。在发酵工业生产中．在进入死亡期之前应及时将发酵液放罐处理。2.特点：整个培养系统与外界没有其它物质交换（O2、CO2、消泡剂、酸碱除外）。整个过程中菌的浓度、营养成分的浓度和产物浓度不断变化，是一种非稳态的培养方法。3.分批发酵的优缺点优点: 操作简单；周期短，不会产生菌种老化和变异等问题；染菌机会少；生产过程和产品质量容易掌握。缺点: 产率低：非生产时间较长、设备利用率低。但由于操作相对较易，目前仍是发酵工业的主要方式二、连续发酵（continuous culture） 1. 概念： 微生物培养到对数生长期时，在发酵罐中不断添加新鲜的培养基，同时不断放出等量代谢物，使微生物细胞在近似恒定状态（恒定的基质浓度、恒定的产物浓度、恒定的pH、恒定菌体浓度、恒定的比生长速率）下生长的培养方式。连续不断地补加新鲜培养基，连续不断地排出培养物2. 特点： 菌的浓度，产物浓度，限制性基质浓度均处于恒定状态。3. 连续培养的优缺点1）省去了反复放料、清洗、装料、灭菌等步骤，避免了延迟期，提高设备的利用率和单位时间产量。2）发酵中各参数趋于恒值，便于自动控制；3）易于分期控制，可以在不同罐中控制不同的条件。优点:缺点: 长期连续培养会引起菌种退化；染菌机会增加。应用：废水处理、葡萄糖酸发酵、酒精发酵等工业中。 例题： 下列对微生物连续培养优点的叙述，不正确的是(??? )。 A．能及时连续补充微生物所需的营养物质，提高产量 B．有利于微生物尽快将代谢产物释放到培养基中 C．提高了设备利用率且便于自动控制与管理 D．能及时排除部分有害代谢产物B三、补料分批发酵（fed-batch culture） 介于分批培养和连续培养之间的操作方法。1.概念：根据菌体生长和初始培养基的特点，在分批培养的某些阶段适当（间歇或连续地）补加培养基，使菌体或其代谢产物的生产时间延长。反复补料分批培养随着补料操作的进行，发酵液的体积逐渐增大，到了一定时候将部分发酵液取出，剩下的发酵液继续进行补料分批培养，如此可反复进行多次，称为反复补料分批培养。间歇添加法恒速流加 (constant-flow rate)指数流加 (exponential-flow rate) 连续流加法2.补料方式：间歇添加营养物质后，其在发酵液中的浓度即会上升，然后随着微生物的利用又下降；再次补入料液后，营养物质浓度再次升高，然后再次下降，呈现较大的波动。◇ 恒速流加操作的补料速度是定值，操作简便，设备简单；最常用；◇ 发酵液体积呈线性增长；由于在指数生长期，微生物的底物消耗也呈指数增加，恒速流加不能维持底物浓度不变，底物浓度会随时间延长而逐渐降低。◇ 指数流加补料的加入量呈指数规律增长，能在短时间内得到最大量细胞，还可通过变更流率指数来控制比生长速率；◇ 但装置相当复杂3.补料分批培养的优缺点 优点： 与分批培养相比(1)解除底物抑制和葡萄糖的分解阻遏效应(葡萄糖效应）。(2)延长次级代谢产物的生产时间。 与连续培养相比(1)降低了染菌，避免了遗传不稳定性。(2)最终产物浓度较高，有利于产物的分离。(3)使用范围广。 缺点：(1)存在一定的非生产时间。(2)由于物料的