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实验一RNA提取方法及原理;实验一、RNA提取方法及原理;;一、研究背景;2 RNA分布;二、方法及原理;RNA提取流程-- 样品前处理注意点;;RNA提取流程--细胞裂解,以释放RNA;RNA提取流程-- RNA的纯化及获得;2. RNA提取的注意事项
杜绝外源酶的污染
a.严格戴好口罩,手套。
b.实验所涉及的离心管,Tip 头,移液器杆,电泳槽,实验台面等要彻底处理。
c.实验所涉及的试剂/溶液,尤其是水,必须确保 RNase-Free。
;;;;复习核酸的提取方法;复习核酸的提取方法;复习核酸的提取方法;Trizol?试剂提RNA的原理; TRIzol法提取流程
1. 样品处理: 组织:取 100mg 组织(新鲜或 -70 ℃ 及液氮中保存的组织均可)置匀浆器中 ,加入 1ml Trizol 充分匀浆,匀浆液转1.5ml 离心管中,室温静置5 min 。
2 .加入 0.2ml 氯仿,振荡 15s ,静置 2min 。
3 .4 ℃ 离心, 13000g × 15min ,取上清。
4 .加入 与上清1:1的异丙醇(约0.5ml),将管中液体轻轻混匀,室温静置 20min (-20 ℃,时间长效果更好)。
取200-300ul从5步往下做。; TRIzol法提取流程;细胞;RNA提取常见问题;
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