蛋白质的结构与功能6.pptxVIP

蛋白质的结构与功能6;什么是蛋白质?;蛋白质的生物学重要性;作为生物催化剂（酶） 代谢调节作用 免疫保护作用 物质的转运和存储 运动与支持作用 参与细胞间信息传递;蛋白质的分子组成The Molecular Component of Protein;组成蛋白质的元素; 各种蛋白质的含氮量很接近，平均为16％。 ;一、组成人体蛋白质的20种氨基酸均属于L-?-氨基酸 ;非极性脂肪族氨基酸 极性中性氨基酸 芳香族氨基酸 酸性氨基酸 碱性氨基酸;三、20种氨基酸具有共同或特异的理化性质;;（二）含共轭双键的氨基酸具有紫外吸收性质;（三）氨基酸与茚三酮反应生成蓝紫色化合物;四、蛋白质是由许多氨基酸残基组成的多肽链;肽是由氨基酸通过肽键缩合而形成的化合物。;N 末端：多肽链中有游离α-氨基的一端 C 末端：多肽链中有游离α-羧基的一端;（二）体内存在多种重要的生物活性肽; 体内许多激素属寡肽或多肽;蛋白质的分子结构The Molecular Structure of Protein;蛋白质的分子结构包括: ;定义: 蛋白质的一级结构指在蛋白质分子从N-端至C-端的氨基酸排列顺序。;二、多肽链的局部主链构象为蛋白质 二级结构; ?-螺旋 (? -helix) ?-折叠 (?-pleated sheet) ?-转角 (?-turn) 无规卷曲 (random coil) ;;二个或三个具有二级结构的肽段，在空间上相互接近，形成一个特殊的空间构象，称为模体(motif) 。;;氨基酸残基的侧链对二级结构形成的影响;三、在二级结构基础上多肽链进一步折叠形成蛋白质三级结构;第29页/共66页;纤连蛋白分子的结构域;（三）分子伴侣参与蛋白质折叠;亚基之间的结合主要是氢键和离子键。;由2个亚基组成的蛋白质四级结构中，若亚基分子结构相同，称之为同二聚体(homodimer)，若亚基分子结构不同，则称之为异二聚体(heterodimer)。 ;五、蛋白质的分类;蛋白质结构与功能的关系 The Relation of Structure and Function of Protein;（一）一级结构是空间构象的基础; 天然状态，有催化活性;肌红蛋白/血红蛋白含有血红素辅基;肌红蛋白(myoglobin，Mb) ;血红蛋白(hemoglobin，Hb);Hb与Mb一样能可逆地与O2结合， Hb与O2结合后称为氧合Hb。氧合Hb占总Hb的百分数（称百分饱和度）随O2浓度变化而改变。;协同效应(cooperativity);???构效应(allosteric effect);（三）蛋白质构象改变可引起疾病;蛋白质构象改变导致疾病的机理：有些蛋白质错误折叠后相互聚集，常形成抗蛋白水解酶的淀粉样纤维沉淀，产生毒性而致病，表现为蛋白质淀粉样纤维沉淀的病理改变。;疯牛病是由朊病毒蛋白(prion protein, PrP)引起的一组人和动物神经退行性病变。 正常的PrP富含α-螺旋，称为PrPc。 PrPc在某种未知蛋白质的作用下可转变成全为β-折叠的PrPsc，从而致病。;第四节;一、蛋白质具有两性电离的性质;二、蛋白质具有胶体性质;三、蛋白质空间结构破坏而引起变性;造成变性的因素: 如加热、乙醇等有机溶剂、强酸、强碱、重金属离子及生物碱试剂等 。 ; 应用举例: 临床医学上，变性因素常被应用来消毒及灭菌。 此外, 防止蛋白质变性也是有效保存蛋白质制剂（如疫苗等）的必要条件。 ;四、蛋白质在紫外光谱区有特征性吸收峰;蛋白质经水解后产生的氨基酸也可发生茚三酮反应。 ;第五节;一、透析及超滤法可去除蛋白质溶液中的小分子化合物;二、丙酮沉淀、盐析及免疫沉淀是常用的蛋白质沉淀方法;免疫沉淀法：将某一纯化蛋白质免疫动物可获得抗该蛋白的特异抗体。利用特异抗体识别相应的抗原蛋白，并形成抗原抗体复合物的性质，可从蛋白质混合溶液中分离获得抗原蛋白。 ;三、利用荷电性质可用电泳法将蛋白质分离;SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳，常用于蛋白质分子量的测定。 等电聚焦电泳，通过蛋白质等电点的差异而分离蛋白质的电泳方法。 双向凝胶电泳是蛋白质组学研究的重要技术。;四、应用相分配或亲和原理可将蛋白质进行层析分离;离子交换层析：利用各蛋白质的电荷量及性质不同进行分离。 凝胶过滤(gel filtration)又称分子筛层析，利用各蛋白质分子大小不同分离。;五、利用蛋白质颗粒沉降行为不同可进行超速离心分离;因为沉降系数S大体上和分子量成正比关系，故可应用超速离心法测定蛋白质分子量，但对分子形状的高度不对称的大多数纤维状蛋白质不适用。;解释名词 ;感谢您的欣赏