基因表达的调节基因表达调节的基本概念及原理原核.pptxVIP

基因表达的调节基因表达调节的基本概念及原理原核;基因表达调节的基本概念及原理 原核生物基因转录调节 真核生物基因转录调节;第 一 节基本概念与原理;;典型的基因表达是储存遗传信息的基因，在一定调节机制控制下，经过转录、翻译，产生有生物活性的蛋白质或成熟的rRNA和tRNA的过程。; 大肠杆菌基因组（约4000个基因)，一般情况下只有5－10%在高水平转录状态，其它基因有的处于较低水平的表达，或者暂时不表达。 人的基因组约含有10万个基因，但在一个组织细胞中通常只有一部分基因表达，多数基因处在沉静状态，典型的哺乳类细胞中开放转录的基因约在1万个上下，即使蛋白质合成量比较多、基因开放比例较高的肝细胞，一般也只有不超过20%的基因处于表达状态。 ;二、基因表达的规律 --时间性及空间性;（2）空间特异性;三、基因表达的方式;无论表达水平高低，管家基因较少受环境因素影响，而是在个体各个生长阶段的大多数或几乎全部组织中持续表达，或变化很小。区别于其他基因，这类基因表达被视为组成性基因表达。 组成性基因表达只受到启动序列或者启动子与RNA聚合酶相互作用的影响。;（2）诱导和阻遏表达; 是指在特定环境因素刺激下，可诱导基因被激活，从而使基因的表达产物增加。 如:DNA发生损伤时，修复酶的基因被诱导激活。 ;如果基因对环境信号应答是被抑制，这种基因是可阻遏基因。;在一定机制控制下，功能上相关的一组基因，无论其为何种表达方式，均需协调一致、共同表达，即为协调表达(coordinate expression)，这种调节称为协调调节(coordinate regulation)。;1、基因表达的多级调控;2、特异DNA序列对基因转录激活的调节;原核生物; RNA聚合酶结合并启动转录的特异DNA序列。;真核生物;顺式作用元件通常是基因的非编码序列。 不同真核生物的顺式作用元件中也会发现一些共有序列 ，如TATA盒、CAAT盒等，这些共有序列是RNA聚合酶或特异转录因子的结合位点。;3、调节蛋白对转录起始的调节;热休克反应;当操纵序列结合有阻遏蛋白时，会阻碍RNA聚合酶与启动序列的结合，或是RNA聚合酶不能沿DNA向前移动 ，阻碍转录。;激活蛋白可结合启动序列邻近的DNA序列，促进RNA聚合酶与启动序列的结合，增强RNA聚合酶活性。;有些基因在没有激活蛋白存在时，RNA聚合酶很少或完全不能结合启动序列。;真核基因的调节蛋白--反式作用因子（转录因子）;转录调节因子结构;（1）调节蛋白与DNA的结合;螺旋-转角-螺旋（HTH）;锌指（zinc finger） 见于TFⅢA和类固醇激素受体中，由一段富含半胱氨酸的多肽链构成。每四个半胱氨酸残基或His残基螯合一分子Zn2+，其余约12-13个残基则呈指样突出，刚好能嵌入DNA双螺旋的大沟中而与之相结合。每个蛋白质分子中可含2-9个锌指结构。 ;常结合DNA的GC盒，也有与mRNA结合的功能。;同质异形结构域;（2）调节蛋白中 蛋白质-蛋白质相互作用结构域;二聚体 亮氨酸之间相互作用形成二聚体，形成“拉链” 。 肽链氨基端20～30个富含碱性氨基酸结构域与DNA结合。;亮氨酸拉链;碱性螺旋-环-螺旋(HLH);4、RNA聚合酶;⑴ 启动序列与RNA聚合酶活性 ;⑵ 调节蛋白与RNA聚合酶活性;第 二 节  原核生物基因转录调节;——调节的主要环节在转录起始;二、乳糖操纵子调节机制;;;CAP—降解物基因活化蛋白 CAP-cAMP复合物; 调节基因转录翻译阻遏蛋白R，R与操纵基因结合，阻止结合在启动子上的RNA-pol前移，结构基因不被转录 。; 由于葡萄糖降解物能降低cAMP含量，不与CAP形成复合物， CAP不能结合到启动子附近，RNA聚合酶不能有效转录，使细菌只能利用葡萄糖。; 细胞内cAMP含量高，cAMP与CAP结合成复合物，与DNA结合，并推动RNA-pol向前移动，促进转录。 ;（4）协调调节;三、其它转录调节机制;第51页/共76页; AraC蛋白通过两种异构体（ P1和P2 ）来实现正、负调节因子的双重功能。 在没有阿拉伯糖时，P1形式占优势，可以与现在尚未鉴定的类操纵区位点相结合， 起阻遏作用。 一旦有阿拉伯糖存在，它就能够与AraC蛋白结合，使P1离开操纵基因位点，构象平衡趋向于P2形式。 P2是起诱导作用的形式，它通过与启动子结合促进RNA-pol开始转录，发挥正向调节作用。;2、色氨酸操纵子的转录弱化调节;;阻遏-操纵机制是一级开关，主管转录是否启动，相当于粗调开关。 前导序列翻译前导肽是二级开关