感染性疾病及免疫学检测.pptVIP

HCV特点 有包膜的单股正链RNA病毒 抗HCV抗体非保护性抗体 输血和非肠道途径传播 主要检测IgG 当前第30页\共有55页\编于星期五\9点 丙型病毒性肝炎(HCV)临床意义 HCV是输血后肝炎和散发性非甲非乙型肝炎的主要病原。HCV感染后可导致慢性肝炎、肝硬化和肝细胞癌等多种肝脏疾病。抗HCV阳性而血清中没有HCV RNA提示既往感染。 当前第31页\共有55页\编于星期五\9点 检测方法 常用检测方法为ELISA法，金标记免疫层析法和化学发光法。 当前第32页\共有55页\编于星期五\9点 检测方法： ELISA 化学发光 当前第33页\共有55页\编于星期五\9点 HIV (Human Immunodeficiency Virus)人获得性免疫缺陷病毒 当前第34页\共有55页\编于星期五\9点 我国历年艾滋病病毒感染者和病人数 当前第35页\共有55页\编于星期五\9点 HIV的结构特点 HIV-1和HIV-2 逆转录病毒 两股相同的正链RNA 当前第36页\共有55页\编于星期五\9点 CD4 抗原 辅助受体 CD4+ 细胞 HIV gp120 结合CD4 / 辅助受体 当前第37页\共有55页\编于星期五\9点 病毒经黏膜或皮肤破损进入体内 感染黏膜或皮肤层树突状细胞 病毒于24小时内在树突状细胞繁殖 病毒于24-28小时到达局部淋巴结 病毒于5天内出现在外周血液中 每个感染细胞可产生5000个病毒颗粒，每人每天可产1010病毒。 当前第38页\共有55页\编于星期五\9点 HIV的检测 筛选试验：敏感性高，如ELISA，胶体金标记层析法。 确诊试验：特异性高，如蛋白印迹试验和IFA 抗体最早在感染后二周，最晚三个月会转为阳性 初筛试验2次阳性，再进行确认试验 当前第39页\共有55页\编于星期五\9点 样品 初筛检测 阳性反应 阴性反应 筛查试剂 复查 原有试剂加另一种筛选试剂 均阳性反应 一阴一阳 均阴性反应 送确认实验室确认 报告阴性 当前第40页\共有55页\编于星期五\9点 结果判断 确诊试验阳性，有临床症状，诊断为AIDS 确诊试验阳性，无临床症状，诊断为HIV感染者 确诊试验阴性，但初筛试验阳性或有临床症状， 3个月后复查 当前第41页\共有55页\编于星期五\9点 梅 毒 syphilis 是梅毒螺旋体引起的一种慢性传染病，本病的特点是病程的长期性和潜匿性，病原体可侵犯任何器官，临床表现出各种不同的症状。 当前第42页\共有55页\编于星期五\9点 三个阶段 一期梅毒：硬性下疳； 二期梅毒：梅毒疹； 三期梅毒：累及心、肝、神经系统、骨等。 当前第43页\共有55页\编于星期五\9点 后天性梅毒（获得性）： 95%性交 传播，少数因输血、接吻、医务人员不慎受染等直接接触传播。 先天性梅毒（胎传梅毒）： 梅毒螺旋体可自患病母体的血液经胎盘传给胎儿 传播方式 当前第44页\共有55页\编于星期五\9点 传染病：是病原体以某种方式进入到人体后，并在人体内生长繁殖，释放毒素或导致机体内微生态平衡失调，给人体的组织和器官造成一定的损伤而引起的疾病。 当前第1页\共有55页\编于星期五\9点 病原体 易感人群 当前第2页\共有55页\编于星期五\9点 免疫学检验主要用于： 辅助诊断及鉴别诊断 判断疗效及预后 流行病学调查 当前第3页\共有55页\编于星期五\9点 常用的免疫学检测方法 酶联免疫吸附试验（ELISA） 金标法（试纸条、试纸板） 化学发光法 1.电化学发光（罗氏） 2.微粒子化学发光（雅培） 免疫印迹法 (Western blotting)? 凝集反应（梅毒检测) 当前第4页\共有55页\编于星期五\9点 酶联免疫吸附试验ELISA （enzyme linked immunosorbent assay） 是一类常用的免疫酶技术。是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面，使抗原抗体反应在固相表面进行。 常用的酶：辣根过氧化物酶(HRP) 碱性磷酸酶（AP）。 当前第5页\共有55页\编于星期五\9点 基本步骤 包被 封闭 孵育 洗涤 显色 结果测定 缺点：1只是诊断的辅助手段，特异性和灵敏性有待提高。2操作过程有些繁琐，反应时间过长，不能一蹴而就。 当前第6页\共有55页\编于星期五\9点 金标法 原理：金标层析法采用双抗原夹心法免疫测定原理，选择经纯化的基因工程制备的抗原，分别作为包被抗原和胶体金结合抗原。由于