核酸基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术在结核病和非结核分枝杆菌病诊断中的临床应用专家共识（2023）要点.pdf

核酸墓质辅剧激光解眼电离飞行时间质谱技术在结核病和非结核台枝抨 菌病诊断申的临床应用专家共识（ 2023 ）要 点 摘要 核酸墓质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（ MALDI-TOF MS ）技术在结核 病与非结核分枝杆菌病病原学和耐药性诊断中的应用越来越多，为阜期诊 断、 鉴别诊断和耐药鉴定提供了快速 、 准确 的依据。 然而，在实际应用 中，临床医生对标本的选择、 留取、 送检时机及注意事项、 报告结果的解 读等的理解和掌握参差不齐，尚需规范化。 本共识总结了核酸 MALDI-TOF MS 检测技术应用于结核病和非结核分枝杆菌病诊断的临床 适应证和标本采集注意事项 ， 介绍了如何正确解读核酸MALDI-TOF MS 一 技 术 鉴 定分枝忏菌 菌种和 耐 药 性 的 报 告 结 果 ，以进 步规范核酸 MALDI-TOF MS 技术在结核病和非结核分枝忏菌病诊断中的临床应用， 提高临床 诊断水平，指导临床开展阜期精准高效的治疗。 结核病是严重威胁人类健康的 重要传染性疾病之一。 世界卫生组织 (WHO）估计，2021年全球高1060万例新发结核病患者，死亡近160 万例，新增45 万例耐多药／利福平耐药结核病患者。真中，我国新发 78 万例结核病患者，新增耐多药／利福平耐药结核病患者约3.3万例，是全球 结核病及耐药结核病高负担国家之 一 ；肺外结 核占所高结核病的 15% ～ 0%4 ，因真容易导致器官或组织功能性损伤和器质性障碍而成为近年来结 核病领域关洼的重点；全球由非结核分枝忏菌（ NTM ）引起的 疾病比例呈 现上升趋势，在很 多发达国家，NTM 病甚至超过了结核病。我国的NTM 分离率 也逐年增高，南方和沿海地区高于北方和内陆地区。宿主及环境因 素对NTM病的流行也高很大影响。｜｜伍床上以NTM肺病最为常见， NTM 肺病的临床表现 、 放射影像学特征 和痰涂片抗酸忏菌染色检查特征与肺结 核极真相似，旦大多数NTM对常用抗结核药物呈天然耐药或耐药率高， 需要 经过数月至数年的漫长复杂的治疗，高时因不能耐受药物的不良 反应 ， 导致治疗不完全或再感染而复发，对人类健康构成重大威胁，已成为全球 关洼的公共卫生健康问题。因此，准确快速诊断和鉴别诊断结核病与NT M 病及真耐药性，对指 导临床开展旱期精准高效治疗至关重要。 第一部分核酸墓质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术的基本原理与特 点 ALDI- 一 墓质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（M TOF MS ）技术是 种直接 分析大分子的质谱技术。 ALDI-TOF MS技术是以核酸作为细菌鉴定的生物标志物 ，基本 核酸M 原理是通过对多靶点墓因片段进行多重PCR特异性扩增，去除脱氧核糖核 音酸后，进行各个位点的单碱基延伸反应，经处理后的延伸反应产物同质 谱所需墓质混合，放入飞行时间质谱仪中运行，每份样本会得到独特的指 纹质谱图， 经过判读后获得菌种及耐药信息。 ALDI-TOF MS技术可以同时针对分枝忏菌的保守墓因片段 ，例如 核酸M 16SrRNA 、 hsp65等基因的多态性进行设计从而快速鉴定分枝杆菌菌种。 已高研究证实，核酸MALDI-OT FMS技术鉴定分枝杆菌及真耐药性真 高较高的准确性。 核酸MALDI-TOFMS技术检测