核酸结构和功能.pptxVIP

核酸结构和功能;2.1 DNA是主要的遗传物质 1869年Miescher从细胞核中分离出含磷很高的酸性化合物，称为核素(nuclein)，1889年Altman制备了不含蛋白质的核酸制品，命名为核酸(nucleic acid) 。Miescher在1892年曾推测核酸可能是遗传物质，但遗憾的是1940年代之前，这一推论未能得到实验的证实，也未得到学术界的重视。 1910年Kossel证明核酸的主要成分是核糖、磷酸和碱基，1924年Feulgen根据核酸所含核糖的结构差别，将核酸分为核糖核酸(ribonucleic acid, RNA)和脱氧核糖核酸(deoxyribonucleic acid, DNA)。 ; Kossel的学生Levene于 1909年发现酵母的核酸含有核糖， 1929年发现核酸中的碱基主要是腺膘呤、鸟膘呤、胸腺嘧啶和胞嘧啶，并证明碱基、核糖、磷酸可以组成核苷酸，核酸则是由核苷酸组成的。1930年Levene发现动物细胞的核酸含有一种特殊的核糖即脱氧核糖, 得出了一个错误概念: 植物核酸含核糖，动物核酸含脱氧核糖。这个错误概念一直延续到1938年，这时方清楚RNA和DNA的区别。Levene还提出了核酸的“磷酸-核糖(碱基)-磷酸”的骨架结构, 解决了DNA分子的线性问题, 并于1935年提出“四核苷酸”学说, 认为这四种核苷酸的聚合体是构成核酸的基本单位，这一观点当时得到了广泛认同，一度阻碍了对核酸的研究工作。; 20世纪50年代以前，尽管已证明了生物体普遍含有DNA和RNA，但由于四核苷酸假说的影响，核酸的研究未能引起足够重视。1943年Chargaff等证明DNA中4种碱基的比例并不相等，四核苷酸假说开始受到质疑。1944年Avery重做1928年Griffith的细菌转化实验，从有致病能力的有荚膜细菌分离蛋白质和DNA，分别加到无荚膜细菌(无致病能力)的培养液中，发现有荚膜细菌的DNA，可以使无荚膜细菌转化为有荚膜细菌，而蛋白质没有这种作用，说明DNA是遗传物质。;The Avery-MacLeod-McCarty experiment. When injected into mice, the encapsulated strain of pneumococcus is lethal, whereas the nonencapsulated strain, like the heat-killed encapsulated strain, is harmless. Earlier research by the bacteriologist Frederick Griffith had shown that adding heat-killed virulent bacteria (harmless to mice) to a live nonvirulent strain permanently transformed the latter into lethal, virulent, encapsulated bacteria. Avery and his colleagues extracted the DNA from heat-killed virulent pneumococci, removing the protein as completely as possible, and added this DNA to nonvirulent bacteria. The DNA gained entrance into the nonvirulent bacteria, which were permanently transformed into a virulent strain.; 但由于四核苷酸假说的影响，这一结果一度受到质疑，理由是： （1）因认为蛋白相对分子质量大，结构复杂，二十种氨基酸的排列组合将是个天文数字，可作为一种遗传信息。而DNA相对分子质量小，只含4种不同的碱基，人们一度认为不同种的有机体的核酸只有微小的差异。 （2）认为转化实验中DNA并未能提得很纯，还附有其它物质。 （3）即使转化因子确实是DNA，但也可能DNA只是对荚膜形成起着直接的化学效应，而不是充当遗传信息的载体。 Avery的进一步研究发现，加入蛋白酶和去除脂类并不影响DNA引起的转化作用，排除了上述质疑，证明了DNA是遗传物质。; 1952年Hershey和Chase分别用35S标记噬菌体T2的蛋白质，用32P标记噬菌体T2的DNA，然后感染大肠