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肺炎克雷伯菌5例临床分离分析 肺炎克雷伯菌可引起呼吸、腹腔、乳腺、出血、尿、胆肠、颅内感染等。这是临床患者最常见的疾病之一。 1 材料和方法 1.1 材料表面 1.2 方法 1.2.1 病原菌分离、鉴定 按照《全国临床检验操作规程》进行标本接种及病原菌分离、鉴定。药敏采用K-B法检测, 结果判断采用美国临床实验室标准化协会 (CLSI) 2014版M100-S24标准判断 1.2.3 平板边缘检测 采用改良Hedge试验, 将0.5麦氏单位的大肠埃希菌ATCC25922均匀涂布于MH平板上, 室温干燥3 min~5 min后, 中间贴美洛培南, 用待检菌自纸片边缘向平板边缘划线, 35℃培养18 h~24 h后观察结果。结果判断:美洛培南抑菌圈内出现矢状生长者为KPC (+) 菌株。 1.2.4 edta法观察 采用EDTA协同试验。用0.5麦氏单位的待检菌悬液涂布MH平皿, 中心贴EDTA纸片, 周围分别贴亚胺培南、美洛培南及头孢他啶纸片 (相距10 mm) , 35℃培养18 h~24 h后观察结果。结果判断:在靠近EDTA纸片侧抑菌圈明显扩大者为产金属酶菌株 1.3 质量控制菌株 肺炎克雷伯菌ATCC700603和大肠埃希菌ATCC25922均购自中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会临床检验中心。 1.4 统计处理 2 结果 2.1 肺炎克雷伯菌的临床分布 2 082株肺炎克雷伯菌标本分布以痰液、伤口分泌物、尿液和血液为主;主要来自于重症监护室、外科、肿瘤科和老年科等 (表1、表2) 。 2.2 克林波特感染的抗性检测 2.2.1 esbns菌株对15种抗菌药物的耐药率 临床分离肺炎克雷伯菌2 082株, ESBLs检出率为53.5% (1 113/2 082) 。2011年-2015年ESBLs检出率分别为50.9%、58.0%、54.9%、54.3%、47.8%。产ESBLs菌株对15种抗菌药物的耐药率均明显高于非产ESBLs菌株, 差异有统计学意义 (P0.01) 。碳青霉烯类抗生素、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星和左氧氟沙星对肺炎克雷伯菌仍然保持较好的抗菌活性 (表3) 。 2.2.2 kpc酶检测 1 113株产ESBLs肺炎克雷伯菌中, 有10株CRKP, 改良Hodge试验均为阳性, 其中1株金属酶阳性 (表4) 。 3 碳青霉烯类药物的耐药机制 肺炎克雷伯菌是医院和社区获得性感染最常见病原菌之一 CRKP对碳青霉烯类抗生素产生耐药的机制主要有3种: (1) 产碳青霉烯酶; (2) 高产ESBL或Amp C酶伴随孔道蛋白下调或缺失, 导致对碳青霉烯类抗生素敏感性下降; (3) 碳青霉烯类抗生素的作用靶点BPB蛋白改变。其中产KPC酶是目前临床上CRKP的最常见耐药机制 产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌在世界范围内的广泛播散已成为严重威胁公共卫生问题的重大事件。病例对照研究显示CRKP感染的病死率明显高于碳青霉烯类抗菌药物敏感菌株组 2011年1月-2015年12月临床规范留取送检标本分离出的病原菌, 剔除重复菌株。 1.2.2 头孢他啶/头孢他啶/拉伸维酸+芽孢噻/前药分子pb 将0.5麦氏单位的肺炎克雷伯菌均匀涂布于MH平板上, 室温干燥3 min~5 min后, 在平板上贴头孢他啶与头孢他啶/克拉维酸、头孢噻肟与头孢噻肟/克拉维酸2组纸片, 35℃培养18 h~24 h后观察结果。结果判断:这2组纸片加克拉维酸比不加克拉维酸抑菌圈增大5 mm以上为阳性。 采用WHONET 5.6软件进行分析。