rs66593747基因型对矮小症患儿CorIGF-1水平及rhGH疗效的影响.docxVIP

? ? r因型对矮小症患儿CorIGF-1水平及rhGH疗效的影响 ? ? 王嫣嫣 王晓萌 卢军见 矮小症在中小学生群体中发病率达3%，治愈率却低于1%[1-2]。研究[3-4]发现，矮小症发生与生长激素分泌不足与缺乏、骨骼发育异常等因素有关。研究[5-6]发现，内质网应激可以经由调节软骨细胞、成骨细胞以及破骨细胞等生长发育介导骨相关疾病发生与进展，而7号染色体上人类同源物(BBF2 human homolog on chromosome 7，BBF2H7)基因与机体内质网应激关系密切。胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor 1，IGF-1)为调节生长发育重要激素之一，与矮小症发生以及病情进展关系密切[7]。皮质醇(cortisol，Cor)可经由抑制胰岛素样生长因子结合蛋白-2降解抑制机体IGF-1，影响机体生长发育[8]。重组人生长激素(recombinant human growth hormone，rhGH)为矮小症常用治疗药物，促进矮小症儿童身体生长发育[9]。本研究旨在探究BBF2H7基因r点基因型对矮小症患儿血清Cor、IGF-1水平及rhGH疗效影响，为矮小症患儿遗传发病原因研究提供参考。 1 资料与方法 1.1 一般资料 选择2018年12月至2020年7月顶山市第一人民医院和郑州市儿童医院收治的93例矮小症患儿以及同期在平顶山市第一人民医院和郑州市儿童医院进行体检的35例健康儿童分别作为研究组与对照组。研究组男性56例，女性37例；年龄4～12岁，平均(8.15±1.76)岁。对照组男性24例，女性11例；年龄3～13岁，平均(8.92±1.64)岁。两组对象一般资料比较，差异无统计学意义(P0.05)，具可比性。 研究组纳入标准：①符合第7版《诸福棠实用儿科学》矮小症诊断标准[10]；②血脂以及血常规检查结果正常；③甲状腺功能以及智力正常；④在入组前患儿未接受治疗或者近期未服用外源性维生素D、肾上腺皮质激素等治疗；⑤研究对象家属同意参与研究，符合《赫尔辛基宣言》中伦理学要求。对照组纳入标准：发育及心理状况正常，研究对象家属同意参与研究，符合《赫尔辛基宣言》中伦理学要求。两组对象排除标准：①肝肾功能损伤者，存在中枢神经系统疾病或者营养不良、肥胖、糖尿病等情况者；②继发因素所致的生长激素分泌障碍；③存在遗传代谢疾病、甲状腺功能异常、骨骼发育异常者。 1.2 方法 1.2.1 r点基因型检测 研究组在进行治疗前、对照组在体检当日采集肘静脉血3 mL，以10 000 r/min转速进行1 min离心，收集上清液，应用RNA提取试剂盒进行总RNA抽提，随后应用逆转录试剂盒逆转录获得cDNA。基因型应用聚合酶链反应进行检测，选择β-actin作为模板，将引物、SYBR Green染料、dNTP加入反应体系中使其体积达20 μL，反应条件设置：93℃、93℃、55℃条件下分别处理2 min、1 min、2 min， 40个循环。基因检测引物与试剂盒购自上海赛默飞世尔科技有限公司，r点：上游5’-TGTAAAACGACGGCCAGT-3’，下游5’-CAGGAAACAGCTATGACC-3’；内参基因GAPDH：上游5’-GTCAAGGCTGAGAACGGGAA-3’，下游5’-AAATGAGCCCCAGCCTTC TC-3’。 1.2.2 血清Cor与IGF-1水平测定 研究组在治疗前、对照组在体检当日采集肘静脉血3 mL以4 000 r/min速度离心处理10 min后取上清液，血清Cor与IGF-1水平分别应用免疫化学发光法与酶联免疫吸附法进行测定，测定按照试剂盒说明书进行操作。试剂盒购自厦门市波生生物技术有限公司与罗氏生物科技有限公司。 1.2.3 rhGH治疗 研究组对象进行营养支持治疗，保持充足睡眠，同时补充一定量的维生素B12以及钙，口服司坦唑醇(广西南宁百会药业集团有限公司，国药准字规格：2 mg×12片×2板)，睡前0.5～1.0 h在臀部外上限或者腹部脐周位置皮下注射rhGH(长春金赛药业股份有限公司，国药准字规格：每瓶4.5 IU/1.7 mg/1.0 mL)，注射剂量为30 μg/(kg·d)，频率为1次/天，6个月为1个周期，共2个周期。疗效评价[11]：依据患儿身高增长情况评估患儿治疗疗效，有效为经过治疗后身高增长超过3 cm，无效为患儿经过治疗后身高增长不足3 cm。 2 结果 2.1 两组对象r点哈德温伯格平衡检验比较 研究组与对照组对象r点AA、AT、TT基因型观察值与期望值比较，差异无