Clostridium_thermocellum与Bacillus_licheniformis共培养分解纤维素的性质.docxVIP

微生物学通报 Microbiology China tongbao@ Oct. 20, 2017, 44(10): 2361-2369 /wswxtbcn DOI: 10.13344/j.microbiol.china.160934 研究报告 研究报告 Clostridium thermocellum 与 Bacillus licheniformis 共培养分解 纤维素的性质 姚义 1 吕育财 1* 龚艳丽 1 邓志威 1 李宁 2 郭金玲 1 田毅红 1 龚大春 1 (1. 三峡大学生物与制药学院 (2. 三峡大学水利与环境学院 湖北 宜昌 443002) 湖北 宜昌 443002) 摘 要：【目的】采取人工构建复合菌系的方法探索微生物协同降解纤维素的机理及菌间关 系。【方法】从一组高温发酵木质纤维素原料产沼气的菌群中分离获得若干菌株，其中一株细 菌经 16S rRNA 基因全序列测序比对后鉴定为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)，将该菌株与 厌氧纤维素分解菌 Clostridium thermocellum CTL-6 进行共培养，菌株组合表现出很强的滤纸纤 维素分解能力。【结果】两菌共培养 9 d，累计滤纸分解量为 484.6 mg，滤纸相对分解率高达 93.2%；pH 变化呈先下降后逐步回升， 培养 3 d 后 pH 由初始时的 7.00 降到最低值 6.57，第 9 天 升至 7.73；菌株组合能同时产生纤维素酶和半纤维素酶， 培养过程中两种酶活性大小均呈不断 上升趋势，最大值分别为 0.32 U/mL 和 0.57 U/mL。利用 HPLC 监测了乳酸、甲酸、乙酸、丙酸和 丁酸 5 种有机酸含量的变化，其中丁酸、丙酸代谢量最高，分别为 1 477.3 mg/L 和 1 068.8 mg/L； 除丙酸外，其他 4 种有机酸含量变化趋势与滤纸降解的变化均无明显相关性。 5 种有机酸总含 量的变化与 pH 的变化趋势一致， 表明对 pH 变化起决定性作用的很可能是某种未检测的酸性 较强的物质含量变化。【结论】Bacillus licheniformis 能有效促进 Clostridium thermocellum CTL-6 的纤维素分解活性， 且该菌株组合可作为后期进一步构建纤维素甲烷转化复合菌系的基础。 关键词： 地衣芽孢杆菌，纤维素分解菌，纤维素生物降解，协同作用，共培养 Foundation item: National Natural Science Foundation of China (No. ; Natural Science Foundation of Hubei Province (No. 2014CFB666) *Corresponding author: E-mail: yucai.lyu@ Received: December 19, 2016; Accepted: February 23, 2017; Published online (): February 27, 2017 基金项目： 国家自然科学基金项目(No.；湖北省自然科学基金项目(No. 2014CFB666) *通讯作者： E-mail：yucai.lyu@ 收稿日期： 2016-12-19 ；接受日期： 2017-02-23 ；优先数字出版日期()：2017-02-27 2362 微生物学通报 Microbiol. China 2017, Vol.44, No.10 Cellulose degradation by co-cultivation of Bacillus licheniformis and Clostridium thermocellum YAO Yi1 Lü Yu-Cai1* GONG Yan-Li1 DENG Zhi-Wei1 LI Ning2 GUO Jin-Ling1 TIAN Yi-Hong1 GONG Da-Chun1 (1. College of Biological and Pharmaceutical Sciences, China Three Gorges University, Yichang, Hubei