基于CRISPRCas系统的多重基因编辑与调控技术.docxVIP

生 物 工 程 学 报 Chinese Journal of Biotechnology /cjbcn DOI: 10.13345/j.cjb.220989 樊祥瑞 等/基于 CRISPR/Cas 系统的多重基因编辑与调控技术 Jun. 25, 2023, 39(6): 2449-2464 ?2023 Chin J Biotech, All rights reserved 2449 2449 ·关键核心技术 · 刘嵘明 大连理工大学生物工程学院教授、博士生导师。南京工业大学生物化 工博士，美国科罗拉多大学博尔德分校博士后，国家高层次人才青年项目获得 者，江苏省优秀博士毕业论文获得者。主要研究方向为合成生物学、基因编 辑、代谢工程等，发表了 50 余篇国内外知名学术期刊论文，以第一作者和通信 作者发表期刊论文 21 篇，包括 Nature Communications、Trends in Biotechnology、 Metabolic Engineering 、Bioresource Technology 等领域内权威期刊，参与编著英 文专著 3 本；申请及授权发明专利 10 余项， PCT 专利 5 项。 梁丽亚 大连理工大学生物工程学院副教授，大连市紧缺人才。主要从事微生 物催化调控合成生物基建筑材料、微生物全局代谢网络多重调控合成生物基化 学品、高通量 CRISPR 定向进化 CAR-T 细胞等方面研究工作。发表了近 50 篇 国内外知名学术期刊论文，申请及授权发明专利 10 余项。 基于CRISPR/Cas 系统的多重基因编辑与调控技术 樊祥瑞，王俊燕，梁丽亚* ，刘嵘明 * 大连理工大学生物工程学院，辽宁 大连 116000 樊祥瑞 樊祥瑞, 王俊燕, 梁丽亚, 刘嵘明 . 基于 CRISPR/Cas 系统的多重基因编辑与调控技术[J]. 生物工程学报, 2023, 39(6): 2449-2464. FAN Xiangrui, WANG Junyan, LIANG Liya, LIU Rongming. Multiplex gene editing and regulation techniques based on CRISPR/Cas system[J]. Chinese Journal of Biotechnology, 2023, 39(6): 2449-2464. 摘 要 ： 规 律成簇的 间隔短回 文重复序 列 (clustered regularly interspaced short palindromic repeats, CRISPR)及其相关 Cas 蛋白所构建的 CRISPR/Cas 系统是古细菌或细菌中特有的一种获得性 免疫系统。研究人员将其开发成基因编辑工具之后，凭借其高效、精准和通用性强等优点迅速成为 合成生物学领域的热门研究方向， 在生命科学、生物工程技术、食品科学及农作物育种等多个领域 引发了革命性的影响。目前基于 CRISPR/Cas 系统单基因编辑与调控技术日益完善，但在多重基因 资助项目：国家自然科学基金；大连理工大学基本科研业务费(DUT22RC(3)012 ，DUT22RC(3)013) This work was supported by the National Natural Science Foundation of China and the Basic Research Expenses of Dalian University of Technology (DUT22RC(3)012, DUT22RC(3)013). *Corresponding authors. E-mail: LIU Rongming, Rongming_Liu@; LIANG Liya, liya_liang@ Received: 2022-12-09; Accepted: 2023-03-29; Published online: 2023-04-13 2450 ISSN 1000-3061 CN 11-1998/Q 生物工程学报 Chin J Biotech 编辑和调控方面仍存在挑战。本文聚焦基于 CRISPR/Cas 系统的多重基因编辑与调控技术开发及应 用，针对单个细胞内实现多位点基因编辑或调控和细胞群体内实现多位点基因编辑或调控技术，依 据作用原理对其进行了系统总结和阐述，包括基于 CRISPR/Cas 系统的双链断裂、单链断裂以及多 重基