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艾滋病实验室检查演示文稿 当前第1页\共有18页\编于星期六\10点 优选艾滋病实验室检查 当前第2页\共有18页\编于星期六\10点 * 实 验 室 检 查 当前第3页\共有18页\编于星期六\10点 * 免疫学检测 AIDS患者 正常(×109/L) CD4 0.2 1(0.8～1.2) CD4/CD8 1 1.2～2.1 淋巴细胞总数 1 2～3 流式细胞仪测定 当前第4页\共有18页\编于星期六\10点 * 血清学检测（１） HIV抗体的初筛试验——ELISA（酶联免疫试验） 当前第5页\共有18页\编于星期六\10点 * 血清学检测（２） HIV抗体的确证试验——Western blot （免疫印迹试验） 当前第6页\共有18页\编于星期六\10点 * 血清学检测（３） HIV抗原检测——ELISA夹心法 测定p24抗原 敏感性很高（7～10 pg/ml） 特异性稍差（可有假阳性） 当前第7页\共有18页\编于星期六\10点 * 分子生物学检测（1） HIV RNA检测—RT-PCR（逆转录-聚合酶链反应） PCR：高温变性(94℃)→低温退火(55℃)→适温延伸(72℃)；经25~30个循环，成倍数扩增 荧光定量PCR：比常规PCR多一个寡聚核苷酸探针（带一个荧光发光分子和一个荧光淬灭分子） 应用：PCR查PBMCs前病毒DNA；RT-PCR查血浆中的病毒RNA 当前第8页\共有18页\编于星期六\10点 * 分子生物学检测（2） 淋巴细胞HIV RNA检测—— Northern印迹杂交(Northern blot) 原理： RNA片段经电泳分离，从凝胶中转移到硝酸纤维素滤膜，再用探针杂交 当前第9页\共有18页\编于星期六\10点 * 分子生物学检测（3） HIV变异株检测——Sanger测序法 原理：核酸扩增时，核苷酸在某一固定点开始，随机在某一特定的碱基处终止，产生A、T、C、G四组不同长度的一系列核苷酸，通过在尿素变性的PAGE胶上电泳，获得DNA序列 当前第10页\共有18页\编于星期六\10点 * 病毒检测 血浆、单核细胞、脑脊液可分离出HIV 操作复杂，主要用于科研 当前第11页\共有18页\编于星期六\10点 * 诊 断 当前第12页\共有18页\编于星期六\10点 * 诊断原则 流行病学史：有静脉注射毒品史；多个性伴和不洁性生活史；输入未经HIV抗体检测的血液和血制品史；HIV抗体阳性所生的子女；其它（如职业暴露或医源性感染史）。 临床表现： 高危对象出现上感样及单核细胞增多症样表现， 颈、腋及枕部淋巴结肿大，肝脾肿大，可考虑急性HIV感染。 无症状期、艾滋病期临床表现。 实验室检查：①HIV抗体阳性，并经确证试验确认。②CD4+T淋巴细胞数明显减少。③HIV RNA和P24抗原的检测有助于早期诊断新生儿的HIV感染。 当前第13页\共有18页\编于星期六\10点