不同助剂对莫西克汀浇泼剂工艺及体外透皮吸收的影响.docxVIP

? ? 不同助剂对莫西克汀浇泼剂工艺及体外透皮吸收的影响 ? ? 杨志远，王存才，马丹阳，王金泉，赵红琼，郝智慧* (1.新疆农业大学动物医学学院，新疆乌鲁木齐 830052；2.中国农业大学动物医学学院，中兽医药创新中心，北京海淀 100193) 寄生虫病是当前宠物疾病中最主要的一类疾病，现有大量的药物应用于宠物寄生虫病的临床治疗[1]。主要驱虫药物有伊维菌素类、阿维菌素类、左旋咪唑、吡喹酮、莫西克汀[2-5]等，莫西克汀作为新兴抗寄生虫，具有广谱、高效、低毒、对环境无污染等优点[6]，目前我国已批准了莫西克汀浇泼剂在奶牛方面的应用[7]，还尚未有在宠物上作为浇泼剂应用的研究。 市面上的驱虫药剂型有很多种，例如片剂、注射剂和滴剂等，但目前并没有宠物方面的浇泼剂型，本试验根据宠物用药的安全性高、透皮吸收迅速、对宠物皮毛无影响等要求，对莫西克汀浇泼剂进行探究。通过对不同助剂筛选；通过高效液相色谱法测定莫西克汀的含量；通过进行大鼠离体皮肤透皮吸收试验，并按照药品稳定性指导原则进行初步稳定性考察。为开发针对犬用高效、安全的浇泼剂产品提供数据支撑。 1 材料与方法 1.1 材料 1.1.1 实验动物 雌性SD大鼠，质量为(160±20)g，来源于斯贝福生物技术有限公司。 1.1.2 主要试剂 莫西克汀(moxidectin)原料(99%)，安徽新宇药业公司惠赠；中链甘油三酸酯、棉籽油、石蜡油、大豆油，特丁基对苯二酚(tert-butyl hydroquinone，TBHQ)、叔丁基羟基茴香醚(butyl hydroxyanisole，BHA)、二丁基羟基甲苯(butylated hydroxytoluene，BHT)、肉豆蔻酸异丙酯、聚异丁烯(分子量1300)、聚异丁烯(分子量2400)，均为上海源叶生物科技有限公司产品；二乙二醇单乙醚，嘉法狮上海贸易有限公司产品；氮酮、二甲基亚砜、合成蜂蜡、色谱级乙腈、色谱级甲醇、无水乙醇，均为国药集团化学试剂有限公司产品；油溶紫、靛蓝胭脂红、柠檬黄，均为辽宁库克生物技术有限公司产品。 1.1.3 主要仪器 高效液相色谱仪(安捷伦1260)，美国安捷伦公司产品；磁力搅拌器(WH220-HT)，WIGGENS THE MAGIC MOTION公司产品；智能透皮扩散仪(TP-6)，天津市精拓仪器科技有限公司产品；十万分之一电子天平(BT 125D)，sartorius公司产品；千分之一天平(ME203)，METTLER TOLEDO公司产品；旋转粘度计(NDJ-8S)，上海平轩科学仪器有限公司产品；综合药品稳定试验箱(型号LHH-250GSP)，上海一恒科学仪器有限公司产品。 1.2 方法 1.2.1 溶剂的筛选 通过性状、溶解性、安全性和稳定性对溶剂进行综合筛选，测定溶剂对莫西克汀的溶解度，确定最终的溶剂。称取等量且过量的莫西克汀分别加入到含10 mL中链甘油三酸酯、棉籽油、液体石蜡、大豆油的烧杯中，在300 r/min、25℃条件下溶解24 h后，通过HPLC检测，得到莫西克汀在不同溶剂中的饱和溶解度[8]。 1.2.2 抗氧化剂的选择 分别称取等量的莫西克汀和3种不同抗氧化剂溶解到10 mL棉籽油中，在相同条件下搅拌至完全溶解。在第0、5、10天检测溶液中莫西克汀的含量变化，筛选出最适抗氧化剂。参考贾善考[9]在艾普利诺菌素浇泼剂中抗氧化剂用量。分别将20 mg、30 mg和50 mg的抗氧化剂加入到浇泼剂中，并在第0、5、10天用HPLC检测莫西克汀的含量变化，确定抗氧化剂的最佳剂量。 1.2.3 黏合剂的筛选 浇泼剂需要对动物的皮肤具有一定黏附作用，根据黏合剂的溶解性、稳定性、黏附性等确定最终的黏合剂。分别使用不同分子质量的聚异丁烯(1300、2400)、合成蜂蜡、空白棉籽油进行浇泼剂制剂，最终选择最适的黏合剂。 1.2.4 指示剂的筛选 通过着色能力、耐热性能和脂溶性、稳定性对指示剂进行筛选。 1.2.5 正交设计工艺优化 选用L9(34)正交试验法确定处方的最佳工艺。每个因素3个水平，工艺温度为(A)、搅拌速度为(B)、溶剂使用量为(C)3个因素(因素水平见表1)。以含量变化和粘度为考察指标进行评分[10]。最终得到的最佳处方工艺。 1.2.6 检测条件 色谱柱：岛津InertSustain C18(4.6 mm×250 mm，粒径5 μm)；柱温：35℃：进样量10 μL；检测波长：242 nm；流动相：C为乙腈，D为乙酸铵，用乙酸调pH至4.2；总时长20 min；流速：2 mL/min(参照农业部公告2168号公告)。 1.2.7 标准曲线的建立 精密称取500 mg莫西克汀到100 mL的容量瓶中，用乙腈溶解并定容，得5000 μg/mL浓度的母液。吸取适量的母液配制成5、