DB37T 357-2003水产品和畜、禽肉中氯霉素残留量检验方法－气相色谱法.pdf

ICS 65.020B04DB37山东省地電方标准DB37/T 3572003水产品和畜、禽肉中氯霉素残留量检验方法--气相色谱法2003-01-24发布2003-02-01实施山东省质量技术监督局发布 DB37/T 357—2003前言本标准的附录A为资料性附录。本标准由中华人民共和国山东出入境检验检疫局提出并归口，本标准由中华人民共和国青岛出入境检验检疫局负责起草，本标准主要起草人：王建华、林黎明、王曼霞、张艺兵、刘兴敏 DB37/T 357—2003水产品和畜、禽肉中氯霉素残留量检验方法-气相色谱法1范围本标准规定了水产品和雷、离肉中氯毒系残留量检验的抽样、制样和气相色谱电子捕获器测定方法，本标准适用于水产品和备、禽肉中氯霉素残留量的检验，2实验方法2.1试样制备从所取原始样品中取出部分有代表性样品，经高速组织势碎机搞碎均勾，充分混勾。用四分法缩分出不少于500g试样，混匀勾，均分成两份。装入清洁容器内，加封后，表明标记。2.2试剂所有试剂均为分析纯级（有机试剂需重蒸馏），水为去离子水。2. 2.1乙酸乙酯。2.2.2甲醇。2.2.3正已烷2.2.4氯化钠。2. 2. 5无水硫酸钠：经650℃灼烧4h，置于干燥器内备用。2. 2. 6硅烧化试剂：Sy1onBFT（99%N,0-双（三甲基硅姚）三氟乙酰胺（BSTFA）+1%三甲基纵硅烷(TMCS) ) .2.3标准物质2.3.1氯霉素：纯度≥99%，2.4标准溶液的配制2.4.1标准储备液的配制准确称取氯霉素标样50mg置50ml棕色容量瓶中，用甲醇溶解，并定容至刻度，混匀，浓度为1mg/mL.2.4.2标准中间液配制：根据需要，用甲醇逐级稀释标准储备液2.5仪器和设备2.5.1具塞型料离心管：15mL、50mL2.5.2离心机.2.5.3均质器。2.5.4旋转蒸发器.2.5.5气相色谱仪：配有电子俘获检测器。2.6测定步骤2.6.1提取与净化称取5g（精确至0.01g）试样于50mL离心管中，加入25mL乙酸乙酯，用均质器均质提取2min，4000r/min离心3min，将乙酸乙酯层移入50ml鸡心瓶中，试样再加入5mL乙酸乙酯，施旋涡混合器混匀1min，合并乙酸乙酯提取液，于40℃旋转蒸发至近干。加入1mL甲醇溶解残渣，再加入25ml4%氯化钠和10mL正已烷，用旋涡混合器混合1min，4000r/min离心3min，弃去正已烷层，水层如10mL正已烷，同上操作，弃去正已烷层。水层中加入15mL乙酸乙酯，用旋涡混合器混合2min，3000r/min离心3min.吸取乙酸乙酯层，通过无水硫酸钠柱（5g）脱水于另一个50mL鸡心瓶中，用少量乙酸乙酯淋洗无水硫酸钠柱。于40℃旋转蒸发至约1mL。2.6.2衍生化 DB37/T 357—2003将浓缩液移入5mL离心管中，用1mL乙酸乙酯洗涤鸡心瓶，合并乙酸乙酯。于40℃吹氨气蒸发至干。加入200正已烷和100硅烷化试剂，于70℃烘箱中加热30min。吹氮气蒸发至干，加入0.50mL正已烷与环已烷混合液（6：4），混匀溶解，供气相色谱测定。2.6.3测定2. 6. 3. 1气相色谱条件a.色谱柱：30m×0.32 m×0.5μm,ultra-2或相当:b.柱温：30°c/sin30°c/sin150℃ (0. 5 min) -★ 270℃ (7. 5 min)★ 290°℃ (5 min) :c.进样口温度：280℃；d.检测器温度：300℃；e.载气：N:，柱流量1mL/min。2. 6. 3. 2标准溶液的衍生化取适量标准溶液，用氢气吹干，加入200正已烷和100硅烷化试剂，于70℃烘箱中加热30min吹氮气蒸发至干，加入0.50L正已烷与环已烷混合液（6：4），混勾溶解，供气相色谱测定。在上述色谱条件下：氯霉素保留时间为2.6.4结果计算用色谱数据处理机或按下列公式计算：A·c - yX=A * m式中：X-试样中氯霉素药物残留含量，mg/kg：样液中硅烷化氯霉素色谱峰面积：As标准工作溶液中硅烷化氯毒素色谱峰面积：标准工作溶液中氯毒素的浓度，μg/mL；[-最终样液的定容体积，mL：最终样液所代表试样量，g-注：计算结果需扣除空白值。测定低限、回收率4测定低限本方法氯霉素的测定低限为0.1μg/kg.4. 1回收率0. 5 μ g/kg5 μ g/kg20 μ g/kg测定次数回收率%回收率%回收率%180. 384. 587. 4290. 588. 789. 8平均85. 486. 688. 62 DB37/T 357—2003