番茄红素对突变剂诱导遗传损伤的抑制作用.docxVIP

番茄红素对突变剂诱导遗传损伤的抑制作用 根据流行病学研究，大量食用水果和蔬菜可以有效降低人类肿瘤的风险。对膳食中能够预防遗传损伤和抑制肿瘤毒性物质的成分的研究也成为近年的热点, 番茄红素 (Lycopene, LP) 就是其中之一, 它是广泛存在于番茄及番茄制品、西瓜、胡萝卜、草莓等果实蔬菜中的天然色素, 是一种重要的类胡萝卜素。研究发现人类前列腺癌发病率与血浆中番茄红素水平呈负相关 1 材料和方法 1.1 材料表面 1.1.1 番茄红素稳定性产品 受试物系由广东某有限公司提供的番茄红素软胶囊, 批 纯度为每100 g产品中含番茄红素2.8 g, 其它成分主要为精制大豆油和防止番茄红素氧化的天然抗氧化剂。小鼠骨髓细胞微核试验中以粟米油配制样品, Ames试验中以二甲基亚砜溶解样品。 1.1.2 小鼠分组及分组 选用广东省医学实验动物中心的普通级动物, 合格证号00A025, NIH (National institutes of Health) 种小鼠50只, 体重18~22 g, 随机分为5组, 每组10只, 雌雄各半。室温22℃~24℃;湿度50%~75%。 1.1.3 蘑菇和s 经组氨酸缺陷、脂多糖屏障缺陷、R因子、四环素抗性、uvrB修复缺陷及自发回变率鉴定合格的鼠伤寒沙门氏菌突变型菌株TA 1.2 方法 1.2.1 大鼠骨髓细胞的微标签 1.2.1. 加大番茄红素设计方案,将不同剂量点并结合其用量 设阴性对照组、致突变物对照组和根据厂家提供的产品每日推荐量13.833 mg/kg得番茄红素日推荐量0.387 mg/kg, 据此设低、中、高浓度番茄红素剂量组, 阴性对照组采用粟米油;致突变物对照组采用50 mg/kg环磷酰胺 (Cyclophosphamide, CP) ;番茄红素低剂量组为1.16 mg/kg, 相当于推荐日服量的3倍;中剂量组为3.87 mg/kg, 相当于推荐日服量的10倍;高剂量组为11.6 mg/kg, 相当于推荐日服量的30倍。 1.2.1. 微生物指标 采用修改的小鼠骨髓细胞微核试验:按《食品安全性毒理学评价程序和方法》试验 式中A:抑制率;C:致突变物对照组微核率;D:受试样品组微核率;E:空白对照组微核率 1.2.2 沙门氏菌回归反应pmes试验 1.2.2. 试验组和溶剂对照组 设联合染毒组即致突变物和不同剂量的番茄红素联合染毒、致突变物对照组、溶剂对照组。番茄红素的最高剂量为140μg, 以下设4个剂量, 每个剂量设3个平皿, 均包括加S 1.2.2. 磷酸盐缓冲液试验 受试样品预处理致突变物后的Ames试验:0.1 ml致突变物及0.1 ml番茄红素同时加入0.5 ml磷酸盐缓冲液 (0.2mol/L, pH 7.4) 中, 加或不加S 受试样品与致突变物同时作用的Ames试验:将0.1 ml同样体积的番茄红素、致突变物与菌液共同加入0.5 ml磷酸盐缓冲液 (0.2 mol/L, pH 7.4) 中, 加或不加S 1.2.2. 菌落实际计数 将细菌悬液用磷酸盐缓冲液稀释10 计算相对菌落形成率A (%) 、相对菌落数D及抑制率F (%) 。A (%) =B/C, 式中B为受试样品组菌落数 (存活试验) , C溶剂对照组菌落数 (存活试验) 。D=E/A, 式中E为各组实际菌落数 (抗突变试验) 。F (%) = (G-H) / (G-I) , G致突变物对照组相对菌落数, H为受试样品组相对菌落数, I为溶剂对照组实际菌落数。 1.3 卡方分割分析 微核采用R×C列联表的卡方检验后再进行卡方分割分析, 按性别分别进行;相对菌落数采用单因素方差分析, 在SPSS 10.0统计软件包上进行分析。 2 结果 2.1 各组大鼠微核试验结果 致突变物对照组 (CP) 的微核率高于阴性对照组, 差异有统计学意义 (P0.01) , 表明致突变物对照组成立。番茄红素各剂量组与致突变物对照 (CP) 组比较, 无论雄鼠还是雌鼠微核率均降低, 差异有统计学意义 (P0.01) 。结果见表1。 2.2 番茄红素对突变剂大鼠伤寒沙门氏菌回复突变菌数的影响 2.2.1 干预样品中的异质结试验，并进行pmes试验 番茄红素与致突变物 (加或不加S) 2.2.2 添加番茄红素和突变剂的pmes试验 不同浓度的番茄红素与致突变物 (加或不加S) 3 番茄红素对环磷酰胺诱导小鼠骨髓微核试验结果 研究报道番茄红素具有抗氧化、抑制突变、降低核酸损伤、预防和抑制肿瘤等多种功能。由于番茄红素是饮食中的天然成分, 安全可靠, 目前已成为保健食品研究的重点。 研究中发现番茄红素在较低浓度 (1.16 mg/kg) 即可对环磷酰胺诱发的遗传损伤具有保护作用, 预先给予番茄红素后环磷酰胺诱导的胸骨骨