食品毒理学论文-(-亚硝酸钠对小鼠肝脏谷丙转氨酶(GPT)和谷草转氨酶(GOT)-的影响).pdfVIP

综合设计性实验报告 亚硝酸钠对小鼠肝脏谷丙转氨酶 (GPT)和谷草转氨酶 (GOT) 的影响 摘要：研究探讨亚硝酸盐急性中毒对小鼠肝损伤的作用。通过将小鼠分组后 进行不同剂量的亚硝酸钠溶液灌胃，使小鼠肝脏损伤，收取小鼠血液后，利用分 光光度计测定其血清的吸光值，而后利用谷丙转氨酶 (GPT)和谷草转氨酶 (GOT) 标准曲线计算出肝脏受损小鼠的 GPT、GOT 活力，不同剂量梯度比拟就能得出亚 硝酸盐对小鼠 GPT 和 GOT 活力的影响。 关键词：亚硝酸钠、谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)、肝脏组织 0 引言 亚硝酸钠是工业用盐，由于其具有咸味且价钱廉价，常在非法食品制作时用 作食盐的不合理替代品。亚硝酸盐类也是食品添加剂，起着色、防腐作用，广泛 用于熟肉类、灌肠类和罐头等动物性食品。亚硝酸盐对人体的损害作用机理是使 血液中的低铁血红蛋白氧化成高铁血红蛋白，失去运输氧的能力而引起组织缺氧 性损害。了解亚硝酸钠对肝脏的影响情况，对修订亚硝酸盐食品添加剂平安使用 剂量和有效治疗亚硝酸盐急性中毒具有参考意义。 1 材料与方法 1.1 仪器和药品 1．试剂 (1)磷酸盐缓冲液〔0.1mol/L，pH7.4)：取甲液420ml 和乙液 80ml，混合均 匀即得。 ①甲液 (0.1mol/L 磷酸二氢钠〕：取 NaH PO ·12H O 35.82g，加蒸馏水溶解 2 4 2 后稀释至 1000ml。 ②乙液〔0.1mol/L 磷酸二氢钾〕：取无水KH PO 13.61g，加蒸馏水溶解后稀 2 4 释至 l000ml。 (2)丙酮酸钠标准液 〔2mmol/L〕：在 100ml 磷酸盐缓冲液中溶解 22.0mg 丙酮 酸钠。 (3)0.4mol/L 氢氧化钠溶液：先配 1mol/L NaOH{(称取 NaOH 40g，用蒸馏水 溶解后稀释至 1000ml 即得)，以 1mol/L NaOH 稀释配成 0.4mol/L NaOH。 (4)SGPT 基质液：精确称取 DL-丙氨酸 1.79g 和α-酮戊二酸 29.2mg，放于 100ml 烧杯内，参加少量 (约 15m1)磷酸盐缓冲液及少量 1mol/L 的NaOH 溶液使其 溶解，并调 pH 至 7.4，放入 100ml 容量瓶内，用磷酸盐缓冲液定容，4℃冰箱保 存，此液每升含α-酮戊二酸 2mmol、丙氨酸 200mmol。 (5)SGOT 基质液：在 100ml 的烧杯中参加 29.2mg α-酮戊二酸和 2.66gDL-天 门冬氨酸，再参加足量的 1mol/L 氢氧化钠，配成溶液，用 1mol/L 氢氧化钠调节 pH 为 7.4，移入 100mg 容量瓶中，用磷酸盐缓冲液定容，4℃温箱保存。此液每 升含α-酮戊二酸 2mmol、天门冬氨酸 200mmol。 (6)2,4-二硝基苯肼液(1mmol/L)：称取 19.8mg 2,4-二硝基苯肼，加 1mol/L 盐酸至 100ml 使之成为溶液。盛于棕色瓶内备用。 (7)亚硝酸钠溶液：亚硝酸钠 0.5g+蒸馏水 100ml 〔c=5mg/ml〕。 2．器材 分光光度计、注射器 (1m1)、灌胃针头、试管、鼠笼。 1.2 动物及分组 健康、未妊娠的小鼠。 亚硝酸钠 LD 220mg/kg(小鼠，经口〕,小鼠每只体重大概 20g(0.02kg)，小 50 鼠胃容量为0.4ml(400ul)。 分组灌胃 亚硝酸钠摄入质量 亚 硝 酸 钠 溶 液 摄 入 量 〔c=5mg/ml〕 1/20 LD 0.22mg 44ul 50 1/10 LD 0.44mg 88ul 50 1/