SN_T 3767.11-2014出口食品中转基因成分环介导等温扩增（LAMP）检测方法 第11部分：玉米MON89034品系.pdf

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 3767.11—2014出口食品中转基因成分环介导等温扩增（LAMP)检测方法第11部分：玉米MON89034品系Loop-mediated isothermal amplification detection method for geneticallymodified components in food for export-Part 11 : Maize MON890342014-08-01实施2014-01-13发布中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局 SN/T 3767.11—2014前言SN/T3767《出口食品中转基因成分环介导等温扩增（LAMP)检测方法》共分为30部分：第1部分：通用要求和定义；第 2部分：筛选方法；第3部分：玉米Bt-11 品系;第4部分：玉米Bt176品系；第5部分：玉米GA21品系；第6部分：玉米MIR162品系；第7部分：玉米MIR604品系；第8部分：玉米MON810品系；第9部分：玉米MON863品系；第10部分：玉米MON88017品系；第11部分：玉米MON89034品系；第12部分：玉米T-25品系；第13部分：玉米3272品系；第14部分：玉米59122品系；第15部分：大豆A2704-12品系；第16部分：大豆A5547-127品系；第17部分：大豆DP356043品系；第18部分：大豆GTS40-3-2品系;第19部分：大豆MON89788品系；第20部分：水稻Bt-63品系;第21部分：水稻KF6品系；第22部分：水稻KF8品系；第23部分：水稻KMD品系;第24部分：水稻LLRICE62品系；第25部分：水稻M12品系；第26部分：水稻T1C-19品系；第27部分：水稻T2A-1品系；第28部分：小麦B73-6-1品系；第29部分：甜菜H7-1品系;第30部分：油菜RT-73品系。本部分为SN/T3767的第11部分。本部分按照GB/T 1.1--2009给出的规则起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本部分起草单位：中华人民共和国广东出入境检验检疫局、中华人民共和国汕头出人境检验检疫局、中华人民共和国上海出人境检验检疫局、中华人民共和国天津出人境检验检疫局、中国检验检疫科Y SN/T 3767.112014学研究院、中华人民共和国辽宁出人境检验检疫局、中华人民共和国珠海出人境检验检疫局、中华人民共和国北京出入境检验检疫局、仲恺农业工程学院、广州迪澳生物科技有限公司。本部分主要起草人：刘静宇、凌莉、蔡颖、刘津、谢力、李晓虹、郑文杰、陈颖、曹际娟、冯家望、曾静、李志勇、高苏娟、石磊、张隽、陈源树、李婷、关丽军。Ⅱ SN/T 3767.11—2014出口食品中转基因成分环介导等温扩增（LAMP)检测方法第11部分：玉米MON89034品系1范围SN/T3767的本部分规定了食品中转基因玉米:MON89034品系特异性的环介导等温扩增（LAMP)初筛检测方法。本部分适用于玉米及其加工产品中转基因宝来MON89034品系特异性成分的定性检测。本方法的定性检测低限为0.5%(质量券数2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T 6682　分析实验室用水规格和试验方法GB/T19495.2转基因产品检实验室技术要求GB/T19495.3转基因产品检测核酸提取纯化方法GB/T19495.7转基因产品检测捕样和制样方法第 2部分:筛SN/T3767.2--2014　出口食品市转基因成芬环介导等温扩增（LAMP)检测方法选方法23防污染措施号染撸施应符合GB/T19495.2的规定。环介导等温扩增检测过程的防4抽样与制样按照GB/T19495.7的规定执行。5核酸提取纯化按照GB/T19495.3的规定执行。6LAMP检测方法6.1原理6.1.11一般原理根据转基因玉米MON89034 品系外源基因和玉米边界序列设计特异性内引物和外引物各一对，特1 SN/T 3767.11--2014异性目标序列和引物碱基序列参见附录 A。引物特异性识别目标序列上的六个独立区域,利用 Bst 酶启动循环链置换反应，在玉米MON89034品系特异目标序列启动互补链合成，在同一链上互补序列周而复始形成有很多环的花椰菜结构的茎-环 DNA混合物；从 dNTP析出的焦磷酸根离子与反应溶液中的Mg²+结合，产生副产物（焦磷酸镁)形成乳白色沉淀，加人显色液，即可通过颜色变化观察判定结果。6.1.2显色液显色原理SYBR Green I