SN_T 2857-2011蜂螨病检疫技术规范.pdf

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 2857-—2011蜂螨病检疫技术规范Quarantine protocol of diagnosis for acariosis of bees2011-05-31 发布2011-12-01实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局 中华人民共和国出人境检验检疫行业标准蜂螨病检疫技术规范SN/T 2857--2011水中国标准出版社出版北京复兴门外三里河北街16号邮政编码：100045网址 www. spc. net. cn电话：6852394668517548中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷开本 880×12301/16印张 0.75　字数 17 千字2011年11月第一版反　2011年11月第一次印刷印数 1—1 600*书号：155066·2-22643 SN/T 2857—2011前言本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本标准参考了国际动物卫生组织（OIE)《陆生动物诊断试验和疫苗标准手册》（2009版)中2.2.1章介绍的方法。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国福建出人境检验检疫局、中华人民共和国重庆出人境检验检疫局和中华人民共和国浙江出人境检验检疫局。本标准主要起草人：郑腾、张志灯、李宋钰、李应国、何永强、赵兴存。 SN/T 2857--2011蜂螨病检疫技术规范1范围本标准规定了蜜蜂的蜂螨病检疫规范。本标准适用于蜜蜂的蜂螨病病原一伍德氏腺螨(Acarapis woodi Rennie)的检疫与鉴定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的应用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用手本文件。GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法3 临床诊断3. 1 发病症状患蜂螨病蜂群的蜂箱门口常出现许多爬蜂，打开蜂箱取一张巢脾，抖动巢脾，使脾上蜜蜂飞起，观察蜜蜂的飞行。病蜂失去飞翔能力，不能高飞而落在地上爬行。有的蜜蜂由于翅基部寄生有伍德氏腺螨，使得翅基部受损，失去平衡，表现为无规则地摆动，使翅垦“K形，有的蜜蜂翅膀自行脱落。对于越冬后感染蜂螨病的蜜蜂可见体躯较小,翅膀斜，飞不高，在地上爬行，一小团一小团地聚集在凹处，翅膀无规则地摆动、颤抖和痉挛，腹部膨大并腹泻。3.2 病理变化伍德氏踏腺螨侵染蜜蜂可分为3个阶段：第一阶段蜜蜂气管病变不明显，依然呈银白色或米黄色，并有环纹和弹性;感染第15d～18d后，由于螨在气管内大量繁殖，病状逐渐明显，气管开始呈淡黄色，布满不规则黑色斑点，弹性受到破坏，此时为螨侵染的第二阶段；感染第27d～30d后，气管中充满了不同阶段的螨，气管壁变成黑色，失去弹性变脆，此时为螨侵染的第三阶段。由于伍德氏跖腺螨刺穿蜜蜂气管壁吸食血淋巴，染病的蜜蜂气管壁会渗出含黑色素的血淋巴。胸部气管的病变会破坏翅膀的运动肌肉，导致蜜蜂失去飞行能力。气管周围的肌肉和神经组织会被螨破坏，新陈代谢发生改变，而且螨的毒素还会造成蜜蜂飞翔肌麻痹，气管的硬化影响飞翔肌的作用。3. 3 流行病学伍德氏腺螨在蜂群中的传播是通过蜂体间的互相接触和摩擦。受精的雌螨从气管内爬出后，附着在蜂体的绒毛上。当蜂体互相接触时，螨抱住另一只擦肩而过的蜂体绒毛并落到新蜂体的体表，先随翅基附近的颤动到达前胸第一对气门,再随气门的呼吸气流侵人开着的气门，进人气管。因此只要有一只具有产卵力的雌螨侵人蜂群，就会很快感染全群其他蜂体。伍德氏腺螨在蜂群之间的传播主要是借助人工分群，购买蜂王与笼蜂以及盗蜂和迷巢蜂等造成。 SN/T 2857-20114实验室诊断4.1设备、材料和试剂4.1.1设备光学显微镜、体视显微镜、大容量离心机和防护用具（包括蜂帽、防垫手套、养蜂工作服和喷烟器）。4.1.2材料测微尺和滤膜（孔径为0.8mm）。4.1.3试剂试验用水（应符合GB/T6682中三级水的规格要求）、冰醋酸、甘油、乙醇、乳酸、氢氧化钾、亚甲基蓝、氯化钠和中性树胶(或合成树胶)。4.2采样、送样和处理采样时除应佩戴蜂帽、防蛰手套、养蜂工作服等防护用品外，还应使用喷烟器镇服密蜂。应主要采集蜂箱前3m范围内爬行、不能飞的蜜蜂，活蜂、濒死蜂或死蜂均可作为样品。如蜂群无典型的临床症状，可随机采集蜜蜂样品。收集的蜂样死亡时间不能超过 2d～3d,也可将蜂样置于4℃下保存（保存时间不超过28d)或在一20℃下保存（保存时间不超过56d）。活蜂和濒死蜂应用乙醇致死或一20℃下冷冻致死。蜜蜂样品在Oudemann氏溶液（配方见附录A)中可以长期保存。4.3直接镜检法在每群蜂群中采集 200只蜂样，从胸部以上除去蜂的翅和腿。将躯体置于 25 mL水中.以10000r/min均质3次制成悬液，每次数秒，