SN_T 4778-2017出口花粉中链霉素和双氢链霉素的测定方法 液相色谱-质谱/质谱法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 4778—2017出口花粉中链霉素和双氢链霉素的测定方法液相色谱-质谱／质谱法Determination of streptomycin and dihydrostreptomycin in pollen for export-LC-MS/MS method2017-05-12 发布2017-12-01实施中华人民共和国发布电04.国家质量监督检验检疫总局刮涂层查真伪 SN/T言本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国江苏出人境检验检疫局。本标准主要起草人：黄娟、刘艳、柳菌、李静静、姜珊、陈惠兰、殷耀、张晓燕、丁涛。 SN/T 4778--2017出口花粉中链霉素和双氢链霉素的测定方法液相色谱-质谱/质谱法1范围本标准规定了出口花粉中链霉素和双氢链霉素的液相色谱-质谱/质谱法测定方法。本标准适用于出口松花粉、玉米花粉、茶花粉、葵花粉、油菜花粉和杂花粉等中链霉素和双氢链霉素的测定和确证。2 规范性文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3方法提要样品中的链霉素和双氢链霉素经提取溶液提取，三氯甲烷沉淀样品中的蛋白质，清液过C18小柱净化后用液相色谱-质谱/质谱法测定。外标法定量。4试剂和材料除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂，水采用GB/T6682中规定的一级水。4.1甲醇：高效液相色谱级。4.2磷酸。4.3叔丁基甲基醚。4.4甲酸：高效液相色谱级。4.5正已烷。4.6三氯甲烷。4.7乙酸铵：CH?CO2NH4，高效液相色谱级。4.8庚烷磺酸钠(C,HisSO:Na）。磷酸钠[NaPO4·（H2O)12]。4.94.10提取溶液：准确称取10.1g庚烷磺酸钠（4.8），4.1g磷酸钠（4.9），用水溶解并转移至1000mL容量瓶中，加5 mIL磷酸（4.2），用水定容至刻度。4.11叔丁基甲基醚-正已烷溶液（4十1，体积比）：准确量取400 mL叔丁基甲基醚（4.3），加人100 mL正已烷（4.5），混合均匀。4.12甲酸溶液（5%，体积比）：准确量取5 mL甲酸（4.4），加人至1000 mL容量瓶中，用水定容至刻度。4.130.02mol/L乙酸铵溶液：准确称取1.54g乙酸铵（4.7），用水溶解并转移至1000mL容量瓶中，用水定容至刻度。1 SN/T 4778—20174.14甲醇水溶液（3十7，体积比）：准确量取300 mL甲醇，加人700 mI水，混合均匀。4.15链霉素标准品［Streptomycin Sulfate，（C2 H3g N,O12）²·（H2SO4）3，CAS No:3810-74-0]纯度大于或等于 98 %4.16双氢链霉素标准品［Dihydrostreptomycin Sesquisulfate Hydrate，（C21 H N,O12）2·（HzSO4），CASNo:5490-27-7I纯度大于或等于99%。4.17标准储备液：分别准确称取适量的链霉素、双氢链霉素标准品，用甲醇水溶液（4.14）配制成浓度为 1 mg/mL的标准储备溶液。0 ℃～4 ℃保存。4.18混合标准中间溶液：分别准确移取一定体积的链霉素、双氢链霉素标准储备液（4.17），用甲醇水溶液（4.14)稀释为 10μg/mL,0℃～4 ℃保存。4.19混合标准工作液：准确移取一定体积的混合标准中间溶液（4.18），用甲醇水溶液（4.14）稀释成1.0 μg/mL,现用现配。4.20C18小柱:500 mg,3 mL,或相当者。4.21微孔滤膜:水相,0.45μm。5仪器和设备5.1液相色谱-串联质谱仪：配有电喷雾离子源(ESI)。5.2分析天平：感量分别为0.01g和0.01mg。5.3高速离心机:8000 r/min。5.4超声振荡器。5.5涡旋混合器。5.6氮吹仪。5.7具塞塑料离心管:50 mL。5.8SPE 固相萃取装置。6试样制备和保存取有代表性的样品约500g，用磨碎机全部磨碎并通过20目筛，混匀，均分成两份作为试样，分别装人洁净的容器内，密封，标明标记，于常温下保存。在制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。7分析步骤7.1样品处理7.1.1提取称取2g试样（精确到0.0l g)置于50 mL具塞塑料离心管中，加人提取溶液（4.10)20 mL，三氯甲烷3mL，于涡旋混匀器上混合3min，混