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薄荷化学成分的分离与鉴定 荷叶是睡莲科的一种干燥叶子。它有苦味和弹性，属于肝、脾和胃。具有清热除湿、升发清阳、凉血止血的功效，主要用于治疗湿热、口渴、湿热、腹泻、脾虚、泻血、呕吐、粪便等症状。 1 高效液相色谱法研究 BRUKER AVANCE Ⅲ 500 超导核磁共振波谱仪 ( TMS为内标, 瑞士Bruker公司) , 安捷伦6520 系列四级杆-飞行时间质谱仪 ( 美国Agilent公司) , Rigaku Saturn 724 单晶衍射仪 ( 日本株式会社理学公司) , Agilent 1200 分析型高效液相色谱仪 ( G1314A VWD串联Alltech 3300 ELSD, 美国Agilent公司) , Agilent 1200 制备型高效液相色谱仪 ( G1361A prep pump、G1365D 1260 MWD, 美国Agilent公司) 。 柱色谱硅胶 ( 青岛海洋化工厂分厂) , 开放C 荷叶药材于2011 年3 月购买于河北省安国市药材市场, 经天津中医药大学张丽娟教授鉴定为睡莲科植物莲 ( Nelumbo nucifera Gaertn. ) 的干燥叶, 植物标本存放于天津中医药大学中医药研究院。 2 不同溶剂萃取物的制备 荷叶药材20 kg, 用体积分数70% 乙醇溶液回流提取, 减压回收浓缩, 用真空干燥箱干燥, 得干膏2 394 g。取干膏2 280 g, 先用水悬浮, 用不同溶剂萃取, 分别得石油醚 ( 32 g) 、二氯甲烷 ( 137 g) 、乙酸乙酯 ( 77 g) 和正丁醇 ( 364 g) 萃取物。对二氯甲烷萃取物进行硅胶柱色谱分离, 以石油醚-乙酸乙酯 ( 体积比10∶1→1∶10) 进行梯度洗脱, 后3 个比例中再以体积比计算, 加入体积分数0. 1%的氨水, 最后用乙酸乙酯和甲醇洗脱, 得到12 个合并流分Fr. 1-12 3 化合物35的合成 化合物1: 黄色粉末。TLC板上, 紫外灯254 nm下有一暗斑, 用体积分数为10% 的硫酸乙醇溶液显色呈亮黄色, 推测可能为黄酮类化合物。 高分辨Q-TOF-MS给出其准分子离子峰m/z 375. 109 2[M + H] 化合物2: 黄色粉末。TLC板上, 紫外灯254 nm下有一暗斑, 用体积分数为10% 的硫酸乙醇溶液显色呈亮黄色, 推测可能为黄酮类化合物。 高分辨Q-TOF-MS给出其准分子离子峰m/z 345. 062 4[M - H] 化合物3: 淡黄色粉末。TLC板上, 紫外灯254 nm下有一暗斑, 用体积分数为10% 的硫酸乙醇溶液显色呈无色。高分辨Q-TOF-MS给出其准分子离子峰m/z 187. 075 3[M + H] 化合物4: 棕黄色固体。TLC板上, 紫外灯254 nm下有一暗斑, 用体积分数为10% 的硫酸乙醇溶液显色呈紫色。高分辨Q-TOF-MS给出准分子离子峰m/z 737. 256 9[M + Na] 化合物5: 白色粉末。TLC板上, 紫外灯254 nm下有一暗斑, 用体积分数为10% 的硫酸乙醇溶液显色呈黄色。高分辨Q-TOF-MS给出其准分子离子峰m/z 197. 118 6[M + H] 化合物6: 无色结晶。TLC板上, 紫外灯254 nm下有一暗斑, 用体积分数为10% 的硫酸乙醇溶液显色呈黑色。高分辨Q-TOF-MS给出其准分子离子峰m/z 477. 188 0[M + Na] 该化合物通过单晶衍射实验, 得出其化合物立体构型, 具体实验操作如下: 单晶的制备: 化合物6 的晶体采用常温蒸发溶剂法生长单晶。取一定量的该物质, 用甲醇慢慢将其溶解, 然后在70 ℃的水浴锅上加热, 再缓缓加入该物质, 直至达到饱和为止, 然后趁热过滤到1 个干净的圆底烧瓶中, 静置5 d后得到单晶样品。 晶体结构测定: 选取大小合适的晶体, 用Rigaku Saturn 724 单晶衍射仪收集数据。采用经人工多层膜聚焦镜单色化的Mo k 4 capfl成岩酶 从荷叶体积分数为70% 的乙醇提取物的二氯甲烷萃取物中分离鉴定了6 个化合物, 分别为: 黄芩新素Ⅱ ( skullcapflavoneⅡ, 1) 、粘毛黄芩素Ⅲ ( viscidulin Ⅲ, 2) 、4-methyl-6-phenyl-2H-2-pyra- none ( 3 ) 、牛蒡酚F ( lappaol F, 4 ) 、黑麦草内酯 ( loliolide, 5) 和黄柏酮 ( obacunone, 6) 。化合物1 ~ 6均为首次从莲属植物中分离得到。