曲尼斯特延缓糖尿病肾病肾间质纤维化的作用及机制.docVIP

中南大学学报(医学版) J Cent South Univ(Med Sci)2013,38(12) ; http 中南大学学报(医学版) J Cent South Univ(Med Sci) 1233 DOI:10.3969/jissn.1672-7347.2013.12.006 /xbwk/fleup/PDF/2013121233.pdf 曲尼斯特延缓糖尿病肾病肾间质纤维化的作用及机制 罗俊辉12,李瑛1,杨阳1,李军1,孙林,段绍斌,刘虹,刘伏友,刘玉平,奚易云,尤燕华,李华 (1.中南大学湘雅二医院肾内科，长沙410011;2.湖南省第二人民医院肾内科，长沙410007) [摘要]目的： 研究曲尼斯特延缓糖尿病肾病肾间质纤维化的作用及机制。方法：建立糖尿病肾病(DKD) 大鼠模 型： SD 大鼠随机分为正常对照组(n=6)、DKD 模型组(n=8)、 曲尼斯特低剂量(n=8)和高剂量治疗组(n=8)。 采用高糖高 脂饲料喂养联合低剂量STZ 注射构建大鼠DKD 模型。成模后，分别予以曲尼斯特200mg/(kg ·d)(曲尼斯特低剂量组) 和400mg/(kg ·d)(曲尼斯特高剂量组)分2次灌胃。于第8周末处死大鼠，收集大鼠24h尿液测24h尿白蛋白排泄量，收 集血测肾功能及血白蛋白；取部分肾组织置于4%中性甲醛溶液中固定，采用免疫组织化学检测肾组织补体C3a受 体 (C3aR),E- 钙黏附蛋白(epithelial cadherin,E-Cadherin),a-SMA, 纤维连接蛋白(fibronectin,FN),I 型胶原蛋白(collagen I,ColI), 干细胞生长因子(stem cell factor,SCF)和干细胞因子受体(c-kit)的表达以及分布； Western印迹检测肾组织 E-cadherin,a-SMA,FN,ColI,SCF 和c-kit蛋白的表达； RT-PCR 检测肾组织FN,ColI,SCF,c-kit mRNA的表达。结 果：曲尼斯特能抑制肥大细胞在DKD 大鼠肾组织的浸润； DKD 模型组肾小管上皮细胞E-cadherin的表达较正常对照组 减少，并可见a-SMA 表达，曲尼斯特可一定程度逆转这一过程；与正常对照组比较， DKD 模型组肾小管间质区域ColI 和FN 的表达增加，曲尼斯特能剂量依赖性地抑制ColI和FN 的表达； DKD 大鼠肾组织SCF,c-kit 蛋白及mRNA 表达增 加；肾组织SCF,c-kit 蛋白表达与肥大细胞浸润程度及肾小管间质FN,ColI 蛋白的表达呈显著正相关。曲尼斯特能抑 制SCF,c-kit mRNA及蛋白的表达(P0.05)。 结论： 肥大细胞参与了DKD大鼠肾间质纤维化的发生发展，曲尼斯特可 能通过阻断SCF/c-kit信号通路，抑制肥大细胞的募集而逆转DKD 大鼠肾小管上皮细胞的EMT, 抑制肾间质纤维化。 [关键词]曲尼斯特；糖尿病肾病；肾间质纤维化；肥大细胞；干细胞生长因子；干细胞因子受体 Role and mechanism of tranilast preventing the progression of tubulointerstilial fibrosis in diabetic kidney diseases LUOJunhui2,LI Ying,YANG Yang,LIJun,SUN Lin,DUAN Shaobin,LIU Hong,LIU Fuyou, LIU Yuping,XI Yiyun, YOU Yanhua,LI Hua (1.Department ofNephrology, Second Xiangya Hospital, Central South University, Changsha 410011; 2.Department ofNephrology, Second Peoples Hospital ofHunan Province, Changsha 410007, China) 收稿日期(Date ofreception):2013-06-04 作者简介(Biography): 罗俊辉，硕士，住院医师，主要从事糖尿病肾病肾间质纤维化方面的研究。 通信作者(Corresponding author): 李瑛， Email:liyingdoctor@163.com 基金项目(Foundation items): 国家自然科学基金81370792);湖南省自然科学基金重点项目(10JJ2011);湖南省科技计划项目 (2013SK3036); 中华医学会临床医学专项资金(1303