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甘蔗渣制备木聚糖的研究 甘蔗是广西的特产。2012年，广西甘蔗产量达到75万元，占全国总收率的60%。蔗渣是甘蔗糖厂最大量的副产物,它是甘蔗经压榨或渗出处理后剩余的纤维残渣,约为甘蔗重量的24%~27%(以蔗渣水分约50%计),并且每生产出1 t的蔗糖,就会产生2 t~3 t的蔗渣。目前除小部分蔗渣用于造纸外,大部分直接被用作锅炉燃料烧掉,不仅造成资源浪费,还严重污染环境。甘蔗渣中含大量的纤维素、半纤维素和木质素,经降解后可得到木聚糖。木聚糖是一种广泛存在于植物纤维中的多聚五碳糖,在玉米芯、甘蔗渣、稻壳以及棉子壳中含量较为丰富,一般能高达30%以上。其降解后所产生的低聚木糖不仅具有促进人体钙吸收、抑制病原菌等多重功效,而且还可以用作基本碳源生产各种发酵产品。张晋博等以甘蔗渣为原料制备低聚木糖。通过单因素试验选取实验因素与水平,响应面分析得出最佳工艺条件为:微波处理压力0.9 MPa、微波处理时间17 min、木聚糖酶用量0.7%(相对于原料甘蔗渣),甘蔗渣酶解液中还原糖含量可达到9.21 mg/mL。最佳条件下的TLC显示:酶解液主要成分是木二糖和木三糖。何亮亮和陆登俊采用响应面分析法优化了甘蔗渣中木聚糖的提取工艺,得到了蔗渣中木聚糖提取的最佳工艺条件为:NaOH浓度8.86%、水解时间205 min、液料比66∶1(mL/g),在此条件下木聚糖的得率为27.94%。丁胜华等从蔗渣中提取木聚糖后,采用酶法水解制备低聚木糖,采用碱法提取工艺为:NaOH浓度4%,料液比1∶15(g/mL),30.0℃提取24.0 h,此条件下木聚糖产率达20.67%。利用蔗渣制备木聚糖具有十分广阔的前景。但要提高木聚糖的产率,必须降低蔗渣的聚合度、结晶度,破坏木质素、半纤维素的结合层,脱去木质素,增加有效比表面积。超声波可以在较低的温度下大大促进溶剂提(浸、萃)取有效成分的过程、降低生产时间、能源、溶剂的消耗以及废物的产生,同时能强化提取过程、提高产率和提取物的纯度,既降低了操作费用,又合乎环境保护的要求,是一种有良好发展前途的新工艺。目前,采用超声波辅助提取甘蔗渣木聚糖影响的报道较少。采用超声波辅助提取甘蔗渣中木聚糖,在单因素的基础上,采用响应曲面法,研究NaOH浓度、超声波处理时间、液料比对木聚糖提取效果的影响,为甘蔗加工副产物的的深度开发及工业化生产提供良好的理论和方法参考。 1 材料和方法 1.1 仪器、设备和测试设备 甘蔗渣:取自南宁糖业股份有限公司。D-木糖、3,5-二硝基水杨酸、氢氧化钠、硫酸、酒石酸钾钠、无水亚硫酸钠、苯酚等均为分析纯。 KQ-300VDE型双频数控超声波清洗器:昆山市超声仪器有限公司;UV-2000型紫外可见分光光度计:尤尼柯(上海)仪器有限公司;pH211pH计:HANNA instruments;DK-S24型电热恒温水浴锅:上海精宏实验设备有限公司;MVS-1漩涡混合器:北京金北德工贸有限公司。 1.2 方法 1.2.1 蔗渣的预处理 将甘蔗渣晾干、除杂后,粉粹过40目筛。将蔗渣在常温下用清水浸泡12 h冲洗去除残余蔗糖,收集蔗渣置于恒温干燥箱中60.0℃干燥至恒重,取出放于干燥器中,备用。 1.2.2 样品处理和蒸发 取原料适量,按照一定的固液比加入氢氧化钠溶液,置于超声波清洗器中。提取结束后,将样品于3 000 r/min离心10 min,取上清液,残渣用蒸馏水反复洗涤至中性,洗液并入上清液中和至pH7~8,旋转蒸发浓缩,定容至100 mL容量瓶中摇匀待用。 1.2.3 木聚糖含量的测定 准确吸取一定量的样品溶液于50 mL容量瓶,加入1.5 mL 3,5-二硝基水杨酸(DNS)溶液和2 mL蒸馏水,于沸水浴中加热5 min,显色后迅速冷却,用蒸馏水稀释定容。另取一50 mL容量瓶,加入1.5 mL DNS溶液,用蒸馏水稀释定容作为空白溶液,用1cm比色皿,选择适当的吸收波长,测定其吸光度并计算木聚糖的含量。 木聚糖提取率=还原搪含量×稀释倍数×0.88/甘蔗渣的质量×100%。 2 结果与分析 2.1 不同波长d-木糖检测 准确吸取标准D-木糖溶液1.0 mL于50 mL容量瓶中,按基本试验法,配成含量为1 mg/L的标准D-木糖溶液选择不同的波长,分别测定其吸光度,见图1。 图1表明:在483 nm处有最大吸收峰,故选择λ=483 nm。 2.2 绘制标准曲线 取6支25 mL具塞刻度试管,分别加入0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2 mL浓度为1 mg/mL的D-木糖标准液,加蒸馏水至2 mL,再加入1.5 mL DNS试剂,充分混合均匀后沸水浴5 min。迅速冷却至室温,在483 nm波长处测定吸光度值,绘制标准曲线。以吸光度y为纵坐标,木糖浓度x为横坐标建立标准曲线,回归方程: