SN 0211-1993《出口粮谷中棕曲霉毒素A检验方法》.pdf

中华人民共和国进出口商品检验行业标准SN 0211---93出口粮谷中棕曲霉毒素A的检验方法Method for determination of ochratoxin Ain grains for export1993-06~04发布1993-08-01实施中华人民共和国国家进出口商品检验局发布 中华人民共和国进出口商品检验行业标准出口粮谷中棕曲霉毒素A的检验方法SN 0211-93Method for determination of ochratoxin Ain grains for export1主题内容与适用范围本标准规定了出口粮谷中棕曲霉素A检验的抽样、制样和薄层扫描测定方法。本标准适用于出口大米、玉米、面粉和大豆中棕曲霉毒素A的检验。2 抽样和制样2.1检验批以不超过 4 000袋为一检验批。同一检验批的商品应具有相同的特征，如包装、标记、产地、规格、等级等。2.2抽样数量按一批总袋数的平方根抽取。α-N10式中：N-—全批袋数；a——抽样袋数。注：α值取整数，小数部分向前进位为整数。2.3抽样工具2.3.1金属单管取样器：全长55cm(包括手柄），直径1.5～2.5cm，沟槽长度应超过袋对角线长度的二分之一。2.3.2取样铲：见图1。2.3.3分样板：见图2。2.3.4样品筒（袋）；可密封。2.3.5分样布或适用铺垫物。13 ~ 15cm图1取样铲中华人民共和国国家进出口商品检验局1993-06-04批准1993-08-01实施1 SN 0211-93ozt27 c口图2分样板2.4抽样方法2.4.1袋内抽样：按2.2规定计算抽样袋数，在堆垛四周上、中、下各部位以曲线形走向，随机抽取。将扦槽潮下，从每袋一角依斜对角方向插入袋内，然后将扦槽旋转朝上，抽出托样器，立即倒入盛样容器内。衔袋扦取样品数量应基本一致。2.4.2倒包抽样：将袋口缝线全部拆开，平置于分样布或其他洁净的铺垫物上，双手紧握袋底两角提起约成45°倾斜角，倒拖1m以上，使袋内货物全部倒出后，用取样铲在各部位扦取样品约100g，立即倒入盛样容器内。2.4.3大样缩分：集中袋内或倒包所取的样品，倒于分样布上，使用分样板按四分法缩分样品不少于4 kg·加封后，标明标记并及时送实验室。2.5试样制备将样品缩分到1kg，全部磨碎，通过20目筛，混匀，均分成两份，装入洁净容器内，密封，标明标记。2.6试样保存将试样于 5℃下避光保存。3测定方法3.1方法提要样品中的棕曲毒素A经提取、浓缩、薄层展开后，用碳酸氢钠-乙醇溶液喷雾，再对标准点和样液点进行荧光强度的扫描定量测定。3.2试剂和材料除另有规定外，试剂均系分析纯，除乙腈外均需重蒸韬。水指蒸馏水或相适应的去离子水。3.2.1三氯甲烷。3.2.2正已烷或石油醚（沸程30～60℃）。3.2.3无水乙醇。3.2.4苯-乙腩(98+2)。3.2.5乙酸-苯溶液（1+99)。3.2.6甲醇-水(55+45)。3.2.7氯化钠溶液：40g/L。称40.0g氯化钠溶于1000mL水中。3.2.8碳酸氢钠-乙醇溶液：将6.0g碳酸氢钠溶于100g水中，并加入20mL无水乙醇。3.2.9棕曲霉毒素A标准贮备液：准确称取棕曲霉素A标准品（准确至0.0001g），配成浓度为10μg/mL的乙酸-苯溶液，作为贮备液。用紫外分光光度计标定浓度（最大吸收峰的波长为333nm，分子量403，摩尔消光系数5550），并作硅胶薄层色谱纯度鉴定，避光，于低温冰箱中保存。3.2.10棕曲霉素A标准工作液：用乙酸-苯溶液将10μg/mL的棕曲霉毒素A标准贮备液精确稀释成浓度为0.5 μg/mL的标准工作液。避光，于低温冰箱中保存。2 SN 0211-933.2.11展开剂3.2.11.1乙醚:经无水硫酸钠脱水。3.2.11.2乙酸乙酯-甲苯-甲酸-甲醇溶液（25+60+10+5）。3.2.11.3乙酸-甲醇-苯溶液（5+5+90）。3.2.12重铬酸钾-硫酸洗液：100g/.。3.2.13无水硫酸钠。3.3仪器和设备薄层扫描仪：备有荧光检测器。3.3.1紫外光灯：100～125W；带有波长365nm滤光片。3.3.23.3.3硅胶G薄层板。3.3.4展开槽。3.3.5展开缸。3.3.6玻璃喷雾器。微量注射器：10μL、20 uL、2 μL。3.3.73.3.8全玻璃浓缩器。3.3.9电动振荡器。3.3.10小型粉碎机。3.4测定步骤3.4.1提取称取20.0g粉碎过筛样品，滑于250mL具塞锥形瓶中，加30ml正已烷或石油醚和100ml，甲醇水溶液，湿润瓶寒，盖紧，振摇30min，静置分层。以快速定性滤纸过滤于250mL分液漏斗中。等下层甲醇-水溶液分清后，放出20ml.甲醇-水溶液于一个带刻度的125mL分液溺斗中，加25mL三氣甲烷，轻摇提取2m