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乳用水牛挤乳过程中血液催产素的变化 在中国，这种淡水不仅会排出少量水分，还会积聚许多水分，因此很难产生牛奶排放。经乳用水牛杂交改良后,泌乳量明显增加,排乳分期现象消失,但乳头括约肌的紧张度仍然较高,并且还常发生排乳抑制现象。因此,在水牛挤奶业中,防止排乳抑制,减轻挤乳强度,提高挤乳效率,是当前亟待解决的问题。 已知乳牛,羊及鼠、兔等实验动物的排乳反射均受神经内分泌调节,下丘脑-神经垂体释放催产素作用于乳腺泡的肌上皮细胞使之收缩,从而引起乳房内压升高,是排乳反射的重要环节,但对于水牛,则尚未见这类研究报道。 当前我国水牛正向乳用方向发展,因此研究乳用水牛的排乳反射特征,不但具有比较生理学意义,而且更有实际应用价值。 1 材料和方法 1.1 水稻品种及饲养管理 选择广西畜牧研究所乳用水牛场泌乳水牛14头,其中摩拉品种9头,尼里品种2头,摩拉、尼里及中国水牛三品种杂交水牛3头。平均泌乳3～6个月,日产乳8.31±0.72 kg,每天4:30和1 5:00手工挤乳各一次。牛群按该场常规饲养。实验时,挤奶等按原来生产程序进行。 1.2 水水测定 实验开始前一天,于一侧颈静脉安装临时性血管插管,管内充满肝素(800 IU/ml)灭菌生理盐水,实验时用于采集血样或注射催产素(上海生物化学制药厂,兽用催产素)。每头牛于挤乳前(开始按摩乳房,尚未挤乳)、挤乳初期(开始挤乳至排乳高峰)、挤乳中期(排乳高峰期持续2～3 min)、挤乳完毕(高峰期至挤完)、挤乳后约10 min各采集一份血样,分离血清,-20℃保存备用。 1.3 马抗兔血清中pge表达 放免药盒由上海第二军医大学生理教研室提供。抗血清最终稀释度为1:15 000,标准曲线可测范围每管3.5～450 pg,反应总体积为1 ml。用驴抗兔血清进行分离;用FT-613γ计数仪进行计数。经测定批内CV为5.8%,批间为8.2%。血样同批测定,RER值0.04。 1.4 乳房内压变化测定 应用本研究室改装的乳房内压计。开始实验时,将连接压力表的导乳管(已经严格消毒)插入一个后乳头,记录喂料、洗刷乳房及挤乳过程中乳房内压变化,每头水牛各进行2～4次实验。 1.5 数据计数 所有数据用平均数±标准误表示(),用t检验差异显著性. 2 结果与讨论 2.1 挤乳期催产素释放效果 实验水牛挤乳过程中外周血液催产素浓度变化情况见表1。 在喂料及挤乳前,外周血液中催产素浓度较低,约有半数实验水牛往往未检测出(10 pg/ml);经洗刷乳房刺激后,催产素浓度有所升高,与在荷兰牛上的观察相一致。开始挤乳后,催产素浓度迅速大幅度增加;在挤乳中期催产素浓度进一步升高,开始挤乳后约1.5 min达到整个排乳过程的峰值(平均865±190 pg/ml)。有的水牛(如摩拉160号、尼里328号)早晨挤乳时竟超过1 000 pg/ml,随后外周血液的催产素浓度下降,但挤乳完毕时仍远高于挤乳前水平(P0.01)。 据Gorewit对乳牛的研究,血清催产素基础水平较高,开始挤乳时浓度迅速升高1倍多,挤乳2 min达峰值,为挤乳前水平的2倍多,挤乳后1h才回复至原先基础水平。本实验泌乳水牛的催产素基础水平较低,开始挤乳后其浓度迅速升高至挤乳前的7～17倍,其峰值为基础水平的34倍。由于水牛的乳池乳量很少,由催产素释放所引起的排乳反射,其乳量接近该次的挤乳量,因此,在水牛泌乳中,排乳反射占更为重要的地位。 虽然挤乳前催产素的基础水平早晨远高于下午,但统计分析表明,早晨或下午对挤乳各期催产素释放动态影响不大。 2.2 挤乳东南角后至400pa 实验水牛挤乳过程中乳房内压变化示于表2。 开始挤乳后,随血液中催产素浓度升高,乳房内压亦出现相应变化(图1)。挤乳中期平均高达4 666 Pa左右,超过挤乳前水平一倍以上(P0.01)。挤乳完毕时降至800 Pa左右(范围在667～1 333 Pa),远低于挤乳前水平(P0.01)。本实验同步检测血液催产素浓度与乳房内压,二者的动态变化呈平行关系(r=0.776,P0.05),表明水牛与乳牛及其他哺乳动物一样,催产素释放促使乳腺肌上皮细胞收缩,乳房内压升高对排乳起决定性作用。 从表1、表2还可见到,虽然挤乳完毕,催产素浓度仍高于挤乳前水平(P0.01),而此时乳房内压却极显著低于挤乳前水平。提示乳房内压产生有赖于乳池充盈乳汁,同时亦反映排乳后乳腺肌上皮及乳导管平滑肌处于宽息状态。 2.3 血液催产素对乳房内压的影响 出现排乳抑制情况下,外周血液中一般未测出催产素或浓度很低。268号水牛实验表明,挤乳前血液催产素的浓度很低,在检测水平以下;挤乳开始后2 mmin,一度升高至400pg/mml左右,说明有部分催产素从神经垂体释放入血液,但未能引起乳房内压上升,没有乳汁排出,故该水牛处于排乳抑制状