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当归挥发油对脑缺血大鼠血液流变学的影响 缺血性脑病（icvd）也称为嗜水性损伤，是神经系统中的常见疾病。由于其发病率高、致残率高，它严重影响了人们的生活安全和生活质量。当归为伞形科当归Angelica sinensis(Oliv.)Diels的干燥根,主治血虚萎黄、眩晕心悸、月经不调、经闭痛经、虚寒腹痛、肠燥便秘、痈疽疮疡等,自古以来一直被广泛用于多种疾病的治疗,素有“十方九归”之称。现代药理学研究表明,当归对缺血脑组织有保护作用。本研究通过大脑中动脉阻断术(MCAO)建立局灶性脑缺血模型,从而探讨当归挥发油对脑缺血损伤大鼠血液流变学的影响,并通过小鼠尾静脉注射胶原蛋白与肾上腺素混合诱导剂诱导血栓形成,研究当归挥发油防止血栓形成的作用。 1 实验材料 1.1 动物驱动scxk SPF级Wistar大鼠60只,体质量250~300 g,SPF级昆明种小鼠50只,体质量18~20 g,雌雄兼用,由甘肃中医学院实验动物中心提供,动物合格证号:SCXK(甘)2004-0006-0003215及SCXK(甘)2004-0006-0000991。 1.2 银杏叶片的制备 当归挥发油(含藁本内酯70%)由甘肃兰州和盛堂制药有限公司提供,批用1%吐温-80(江苏省海安石油化工厂生产,批助溶,蒸馏水配制成所需浓度;银杏叶片,25 mg/片,贵州信邦制药股份有限公司产品,批LBY-N6A型自清洗旋转黏度仪,北京普利生科贸集团生产。 2 实验方法 2.1 树叶片组织造模方法 将60只大鼠随机分为6组,每组10只,分别为假手术组(灌胃等容积生理盐水)、模型组(灌胃等容积生理盐水)、当归挥发油小剂量组[灌胃剂量为50 mg/(kg·d)]、当归挥发油中剂量组[灌胃剂量为75 mg/(kg·d)]、当归挥发油大剂量组[灌胃剂量为100 mg/(kg·d)]、阳性对照组[灌胃银杏叶片混悬液,剂量为50 mg/(kg·d)],各组灌胃7 d,每天2次,每次2 mL,于末次给药1 h后造模。造模方法:以7%水合氯醛(5 mL/kg)腹腔注射麻醉大鼠,将大鼠固定,使右侧面部朝上,剃毛消毒后,在右眼与右耳间中点划一长约2 cm的垂直弧形切口,切开颞肌并向嘴侧翻起,在颧弓与颞鳞骨接合处的前端2 mm处用牙科钻做一直径约4 mm的骨窗,暴露大脑中动脉(MCA),轻轻挑起后电凝阻断位于嗅束内1~2 mm至大脑下静脉处的一段,阻断血管后逐层缝合颞肌及皮肤,待苏醒后放回鼠笼,单独饲养。假手术组按上述步骤切开、缝合,但不凝闭MCA。术后72 h股动脉取血,以20 U/mL肝素制备抗凝血液及血浆,测定全血黏度、血浆黏度和红细胞压积,由计算机直接计算出全血还原黏度、红细胞聚集指数和红细胞变形指数。 2.2 灌胃银杏叶片混悬液制备方法 将50只小鼠随机分为5组,即模型组(灌胃等容积生理盐水)、当归挥发油小剂量组[灌胃剂量为5 mg/(kg·d)]、当归挥发油中剂量组[灌胃剂量为10 mg/(kg·d)]、当归挥发油大剂量组[灌胃剂量为15 mg/(kg·d)]、阳性对照组[灌胃银杏叶片混悬液,剂量为5 mg/(kg·d)],各组灌胃7 d,每天2次,每次0.2 mL。末次灌胃给药1 h后尾静脉注射胶原蛋白(225μg/只)-肾上腺素(9μg/只)混合诱导剂诱导血栓形成,小鼠出现死亡或者偏瘫,观察5 min内小鼠的死亡数和15 min内小鼠偏瘫恢复数。 2.3 统计方法 实验数据运用SPSS 13.0统计软件处理,以表示,组间比较采用单因素方差分析。 3 结果 3.1 各组全血黏度及血浆黏度比较 经脑缺血损伤后,模型组大鼠低、中、高切变率下的全血黏度及血浆黏度均显著升高,与假手术组比较,差异有统计意义(P0.05);当归挥发油各剂量组及阳性对照组可显著降低低、中、高切变率下的全血黏度,与模型组比较,差异有统计意义(P0.05),对血浆黏度无明显的影响;各给药组间比较差异无统计意义(P0.05)。结果见表1。 3.2 挥发油对全血还原黏度的影响 经脑缺血损伤后,模型组大鼠全血还原黏度显著升高,与假手术组比较,差异有统计意义(P0.05);当归挥发油各剂量组及阳性对照组可显著降低低、中、高切变率下的全血还原黏度,与模型组比较,差异有统计意义(P0.05);各给药组间比较差异无统计意义(P0.05)。结果见表2。 3.3 各组红细胞聚集指数、红细胞变形指数的比较 经脑缺血损伤后,模型组大鼠的红细胞压积、红细胞刚性指数显著升高,与假手术组比较,差异有统计意义(P0.05);红细胞聚集指数与红细胞变形指数变化不大,与假手术组比较,差异无统计意义(P0.05);当归挥发油各剂量组及阳性对照组可显著降低红细胞压积及红细胞刚性指数,与模型