血清α淀粉酶AMSEPSG7法测定-检验科生化室作业书.pdfVIP

志不强者智不达，言不信者行不果。——墨翟 【实用】检验科SOP 文件 血清α淀粉酶 AMSEPSG7 法测定 1.实验原理 AMS 测定采用酶动态比色测定法。所用底物为4,6-亚乙基-,D-麦芽 七糖苷-对硝基苯酚（EPS－G7 ）。样品中－淀粉酶分解底物EPS－G7， 生成对硝基苯酚（PNP），在405nm 处比色，吸光度的上升速率与样 品中-淀粉酶的活力成正比。 2 亚乙基－G5＋2G2PNP 5EPS-G7 ＋5H2O -淀粉酶2 亚乙基－G4 ＋2G3PNP 亚乙基－G3 ＋G4PNP -葡萄糖苷酶 2G2PNP＋2G3PNP＋G4PNP ＋14H2O5PNP＋14G （反应式中PNP：对硝基苯酚；G：葡萄糖） 2.标本采集与处理： 2.1 病人准备：无特殊要求。 2.2 标本类型：血清、肝素或EDTA 处理的血浆、尿液。 2.3 血清分离血清或血浆应在收集后尽快分离出来。未酸化的尿液， 随机或限时收取。 3.标本存放：不要用嘴吸取标本或对标本吹气，以免唾液污染标本 唾液中的淀粉酶使结果升高。血清淀粉酶在20～25℃稳定一个星期， 避免微生物降解作用；在2～8℃时稳定一个月。尿液样品在2～8℃ 可稳定10 天，在15～25℃可稳定2 天。对于尿液，酸性pH 值可使 淀粉酶的稳定性减弱，因此，储存前pH 值应调至大约7.0 。 药海无涯 学无止境 专注医学领域 勿以恶小而为之，勿以善小而不为。——刘备 天行健，君子以自强不息。地势坤，君子以厚德载物。——《易经》 【实用】检验科SOP 文件 4.标本运输：常温条件下运输 5.标本拒收标准：细菌污染、溶血的不能做测定。 6.实验材料： 6.1AMS 测定试剂盒（试剂16 ×64ml ＋试剂26 ×16ml） 6.1.1 试剂组成 试剂1： GOOD’S 缓冲液 pH7.1100mmol/L 氯化钠50mmol/L 氯化镁10mmol/L -葡萄糖苷酶≥23KU/L 试剂2： EPS－G73mmol/L 6.1.2 试剂准备：试剂为即用式。 6.1.3 试剂稳定性与贮存：原试剂避光保存于2～8℃，若无污染， 可稳定至失效期。试剂有效期为24 个月。 6.1.4 变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染则试剂不能使 用。 6.1.5 注意事项：唾液和皮肤中含有-淀粉酶，应避免用嘴吸取试 剂，避免皮肤接触试剂。试剂中含叠氮钠，避免接触皮肤及粘膜 。 6.2 校准品：参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件 6.3 质控品 ：参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件 7.仪器：奥林巴斯 AU1000 生化分析仪 8.操作步骤 药海无涯 学无止境 专注医学领域 人之为学，不日进则日退，独学无友，则孤陋而难成；久处一方，则习染而不自觉。——《顾炎武》 海纳百川，有容乃大；壁立千仞，无欲则刚。——林则徐 【实用】检验科SOP 文件 8.1 项目基本参数：参见生化检验奥林巴斯 AU1000 生化分析仪项 目测定参数.SOP 文件 8.2 仪器操作步骤：参见生化检验奥林巴斯 AU1000 生化分析仪操