黄精多糖对睡眠干扰诱导小鼠认知功能损伤的作用及机制研究.docxVIP

? ? 黄精多糖对睡眠干扰诱导小鼠认知功能损伤的作用及机制研究 ? ? 刘雨培，张瑛毓，韦 震，刘佳萌，孙 晶，范 蓓，王 琼，卢 聪, ，刘新民 ，王凤忠, （1.湖南中医药大学药学院，湖南长沙 410208；2.中国农业科学院农产品加工研究所，北京 100193；3.中国医学科学院药用植物研究所，北京 100193） 快节奏、高压的生活方式往往会产生失眠、睡眠质量下降、昼夜节律颠倒等问题，长期的睡眠不足会造成认知功能损伤[1-2]。认知功能损伤是中枢神经退行性疾病的前驱症状，认知功能下降会导致轻度认知障碍，进而发展成为痴呆。而与其它疾病相比，功能性损伤无明确的病变部位，靶点不明确，现代医学难以作用。传统中医药讲究整体观念、天人合一、辩证论治，多成分、多靶点、多途径整体协调在防治功能性损伤方面发挥着独特的优势。同时随着我国“健康中国2030”国家战略需求的提出，那么通过中医药与日常饮食相结合进行食养食疗来预防及干预此类功能性损伤意义重大，因此对具备改善认知功效食品功能因子进行挖掘并利用研究具有重要现实意义。 黄精为百合科黄精属（Liliaceae）多年生草本植物的干燥根茎，中国药典将其分为黄精（Polygonatum sibiricumRed.）、多花黄精（PolygonatumcyrtonemaHua.）、滇黄精（Polygonatum kingianumColl.et Hemsl.）3种[3]。黄精作为传统食药同源物质，具有防治抑郁[4]、改善睡眠障碍[5-7]、改善认知障碍[8-9]等多种神经精神类疾病的作用[10]。现代研究表明，黄精粉末[11]、黄精水/醇提取物[12]、黄精多糖[13]等均可改善认知功能损伤。其中黄精多糖（PolysaccharideofPolygonati Rhizoma，PSP）被认为是黄精的主要活性成分[14]，研究发现黄精多糖是黄精降低氧化应激水平、增强免疫、缓解炎症反应、促进神经递质释放等多重生物活性的活性组分，同时具有改善血管性痴呆[15]、东莨菪碱诱导认知障碍[16]、D-半乳糖诱导衰老模型[17]、自然衰老记忆损伤模型[11]等多种认知损伤的作用。 目前有关黄精多糖改善认知功能相关研究主要集中于化学因素引起的认知障碍模型，而对于模拟长期暴露于慢性应激因素如长期睡眠剥夺下所诱导的认知功能损伤，黄精多糖是否具备改善作用及其可能 的作用机制研究未见报道。睡眠干扰模型是一种通过模拟人类睡眠缺乏而导致认知损伤的慢性应激模型，造模方式包括化学造模和物理造模，化学造模为药物睡眠剥夺，物理造模包括轻柔刺激、滚筒法和水平台法等，滚筒法睡眠干扰是模拟现代亚健康人群建立认知功能性损伤模型的重要的手段，因此本实验采用滚筒式睡眠干扰仪建立睡眠干扰诱导认知功能损伤小鼠模型，研究黄精多糖干预对慢性应激诱导认知功能损伤的防护作用和分子机制，以期为黄精的精深加工利用奠定理论基础。 1 材料与方法 1.1 材料与仪器 SPF级雄性ICR小鼠 18～22 g，72只，购自北京维通利华实验动物有限公司，许可证号 SCXK（京）2021-0006。本实验方案开展前已获得中国医学科学院药用植物研究所实验动物管理与动物福利委员会（IACUC）的审查许可；小鼠饲养于SPF级动物房，饲养条件：温度（22±2）℃，湿度55%±10%，光照12 h黑暗交替，每笼6只，自由摄食饮水，常规饲养3 d后进行实验；银杏叶提取物 （金纳多，生产企业：Dr.Willmar Schwabe GmbH Co. KG，批准文号：国药准字HJ20 140768；每片含银杏叶提取物（GBE）40 mg，其中银杏黄酮苷9.6 mg，萜类内酯2.4 mg）；黄精多糖 购自上海源叶生物科技有限公司（纯度70% 批号S27804）；白介素-6（IL-6）、白介素-1β（IL-1β）、γ-氨基丁酸（GABA）、乙酰胆碱（Ach）试剂盒 均购自南京建成生物工程研究所。 5810R 高速冷冻离心机 德国 Eppendorf 公司；M1000 多功能酶标仪 瑞士 Tecan 公司；KSYYI18S418M1滚筒式睡眠干扰仪、KSYY-OP- V4.0小鼠旷场实时检测分析系统、物体认知实验装置、KSYY -MWM- 4.0小鼠 Morris水迷宫实时在线检测系统、KSYY-AD-V4.0小鼠避暗实时检测分析系统 均由中国医学科学院药用植物研究所、中国航天员中心和北京康森益友科技有限公司联合研发。 1.2 实验方法 1.2.1 动物分组及给药 小鼠随机分成6组，空白组（蒸馏水）、模型组（蒸馏水）、阳性对照组（银杏叶提取物40 mg·kg-1）、黄精多糖低剂量组（100 mg·kg-1）、黄精多糖中剂量组（200 mg·kg-1）、黄精多糖高剂量组（400 mg·k