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炙甘草汤抗心律失常作用的实验研究 甘草炒来自《伤寒》第177条。“伤寒、脉博细，心悸，甘草汤是主要。”其方组成如下:炙甘草四两 (炙) 、生姜三两 (切) 、桂枝三两 (去皮) 、人参二两、生地黄一斤、阿胶二两、麦门冬半升 (去心) 、麻子仁半升、大枣十二枚。该方是临床治疗早搏的有效处方。本实验研究炙甘草汤的临床应用范围, 旨在观察该药的抗实验性心律失常作用。 1 材料和机器 1.1 试剂和试剂厂产品 炙甘草汤, 为棕褐色浸膏, 由河南中医学院药剂学教研室提供;盐酸普帕酮片, 江苏鹏鹞药业有限公司产品, 批号000313;氯化钙, 中国上海兴达化工试剂厂产品, 批号980901。三氯甲烷 (氯仿) , 化学纯, 上海试剂一厂产品, 批号940729。乌头碱 (ACONITINE) , sigma公司;乌拉坦, 曹阳第二化工厂产品, 批号97102。 1.2 动物 Sprague-Dawlay (SD) 大鼠、KM小鼠, 均由郑州大学动物实验中心提供。 1.3 pc/回用控制系统财产安全 ECG-6511型心电图机, NIHON KOHDEN CORPORATION;TXTOI型微型灌注泵, 上海医疗器械厂产品;DH-150型人工呼吸机, 浙江大学医疗仪器厂产品;YC-1 ELECTRONIC STIMULATOR, RODENT VENTILATOR 。 2 方法和结果 2.1 小鼠单次给药和小鼠体系中小鼠的行为检测 选取KM小鼠100只, ♀♂各半, 体重在28～30 g, 随机分为5组, 即①空白对照组:生理盐水20 ml/kg;②普罗帕酮组0.2 g/kg;③脉安Ⅰ组:13g/kg;④脉安Ⅱ组:39 g/kg;⑤脉安Ⅲ组:78 g/kg。各组每日按20 ml/kg灌胃给药1次, 连续给药5 d。末次给药后1 h, 将小鼠置于倒扣的600 ml烧杯中, 取氯仿2 ml滴于棉球上, 让小鼠吸入氯仿直至呼吸停止 (每测试1只小鼠, 加0.5 ml氯仿) 。立即取出小鼠, 打开胸腔, 肉眼观察小鼠心脏活动节律, 记录各组小鼠产生室颤的动物数, 其结果进行χ2检验。结果见表1。 实验结果显示, 空白对照组小鼠室颤的发生率高达70%, 而普罗帕酮组和炙甘草汤3个剂量组均能降低小鼠室颤发生率, 其中以普罗帕酮组、脉安Ⅲ组作用更为明显, 与空白对照组比较差异显著 (P0.05) , 表明炙甘草汤具有对抗氯仿致小鼠心室颤动的作用。 2.2 对大鼠心动过速的影响 取健康SD大鼠50只, ♀♂各半, 体重200～230 g, 随机分为5组。分别为①空白对照组:生理盐水10 ml/kg;②普罗帕酮组:0.2 g/kg;③脉安I组:7g/kg;④脉安II组:21 g/kg;⑤脉安III组:42 g/kg。每组按10 ml/kg灌胃给药1次/d, 连续5 d。末次给药后1 h, 用乌拉坦1.2 g/kg腹腔麻醉, 仰位固定。股静脉注入3.5%CaCl2溶液105 mg/kg (3 s内推完) , 并记录心电图II导联, 以观察其心律失常情况。分别记录室速和心电图恢复的时间。结果见表2。 结果显示, 炙甘草汤3个剂量组均能推迟大鼠室性心动过速的发生时间, 加快心电图的恢复时间, 与空白对照组比较有明显差异 (P0.05, 0.01) 。表明炙甘草汤对CaCl2致大鼠心律失常有明显的对抗作用。 2.3 不同给药剂量对心律失常的影响 选取健康SD大鼠50只, ♀♂各半, 体重200～250 g, 随机分为5组。分别为①空白对照组:生理盐水10 ml/kg;②普罗帕酮组:0.2 g/kg;③脉安I组:7g/kg;④脉安II组:21 g/kg;⑤脉安III组:42 g/kg。每组按10 ml/kg灌胃给药1次/d, 连续5 d。末次给药后1 h, 用乌拉坦1.2 g/kg腹腔麻醉, 仰位固定。由股静脉注入乌头碱 (用微量灌注泵推注, 乌头碱浓度为10 μg/ml, 速度为0.28 ml/min) , 同时监测心电图Ⅱ导联。观察注射乌头碱后大鼠发生心律失常的情况, 分别记录室早 (VPB) 和室速 (VT) 、室颤 (VF) 的出现时间, 并折算成相应的乌头碱剂量。结果见表3。 结果显示, 炙甘草汤3个剂量组能明显推迟VPB, VF, VT, 提高大鼠对乌头碱的耐受剂量, 与空白对照组比较有明显差异 (P0.05, 0.01) , 表明炙甘草汤对乌头碱致大鼠心律失常有明显的保护作用。 2.4 小鼠心律失常事件及其结果 选取健康SD大鼠60只, ♀♂各半, 体重210～250 g, 随机分为①空白对照组:生理盐水10ml/kg;②普罗帕酮组:0.2 g/kg;③脉安Ⅰ组:7g/kg;④脉安Ⅱ组:21 g/kg;⑤脉安Ⅲ组:42 g/kg。各组灌胃给药1次/d,