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白多糖对实验性小鼠和大鼠胃黏膜损伤的影响 多孔是一种天然的高分子，在自然界分布广泛。这是生命的四种基本物质之一。它不仅具有多种生物活性，而且几乎没有中毒。近些年,学者们陆续发现某些多糖具有明显的抗溃疡活性,为抗消化性溃疡药物的研发提供了广阔的前景。白芨( Rhizoma Beletillae )为传统止血药,具有止血收敛、消肿生肌之作用,素有“必涩而收,入肺止血,生肌治疮,……外科最善”之称,临床主要用于治疗肺伤咳血、咯血、外科创伤、溃疡等。其主要成分为多糖、挥发油等。本文拟对白芨多糖抗胃溃疡药理作用进行研究。 1 白多糖对应激性胃黏膜损伤的影响 1.1实验药物 白芨购自浙江省中医院。白芨块茎烘干、破碎,取300 g用甲醇连续抽提2次,每次1 h。残渣干燥后,在残渣中加入蒸馏水浸泡2 h,不断搅拌,水浴抽提(60 ℃),连续2次,合并抽提液,离心(3 000 r/min),去除沉淀,上清液浓缩至小体积,加入3倍量95%乙醇,4 ℃静置过夜,沉淀用丙酮、乙醚反复洗涤,真空干燥得白芨多糖。多糖含量测定:采用蒽酮—硫酸法测定总糖,以葡萄糖为标准品,3,5-二硝基水杨酸法测定还原糖;多糖=总糖-还原糖。测得的多糖含量为31.5%。红星二锅头酒(56°)为北京红星股份有限公司生产。 1.2动物 雄性清洁级昆明种小鼠100只,体质量18~20 g;雄性清洁级SD大鼠50只,体质量210~220 g。动物均由浙江中医药大学实验动物中心提供。实验在浙江中医药大学实验动物中心(动物实验条件合格证号:医动字第220010004号)完成。 1.3方法 1.3.1白芨多糖对应激性胃溃疡小鼠胃黏膜损伤的影响 雄性清洁级昆明种小鼠50只,随机分为5组,每组10只。白芨多糖低剂量组予白芨多糖1 mg/只灌饲,中剂量组予白芨多糖3 mg/只,高剂量组予白芨多糖6 mg/只。对照组与模型组均予灌饲生理盐水,每天1次,连续给药10 d。第10天除正常组,其余组均于给药后2 h将小鼠用乙醚轻度麻醉,垂直浸入23 ℃水中,深度至动物剑突水平。12 h后处死所有动物,结扎幽门和贲门后取出胃。生理盐水洗净后,用甲醛固定液使胃体充分膨胀,并于甲醛固定液中浸泡1 h后沿胃大弯处解剖胃体,镜检小鼠胃黏膜损伤作为溃疡指标。胃黏膜出血点状损伤计数标准:胃黏膜条索状损伤的长度1 mm而宽度≤1 mm者测量其长度,按1分/mm计;若损伤宽度1~2 mm者,将其计分加倍;总分为该动物的溃疡指数。 1.3.2白芨多糖对乙醇诱导的小鼠胃溃疡胃黏膜损伤的影响 将小鼠随机分为5组,每组10只。正常组及模型组给予生理盐水灌饲,白芨多糖低剂量组予灌饲白芨多糖1 mg/只,中剂量组予3 mg/只,高剂量组予6 mg/只。连续给药10 d,每日1次。末次给药后1 h,除正常组外,其余各组灌服红星二锅头2 mL/只。3 h后处死所有动物,解剖取胃。镜检小鼠胃黏膜损伤作为溃疡指标,损伤计数标准同上。 1.3.3白芨多糖对大鼠胃溃疡幽门结扎型胃黏膜损伤的影响 随机将雄性清洁级SD大鼠分为5组,每组10只。白芨多糖低剂量组予白芨多糖4 mg/只,中剂量组予白芨多糖8 mg/只,高剂量组予白芨多糖16 mg/只,正常组和模型组予等容积生理盐水,连续灌胃给药10 d,在末次给药前25 h禁食自由饮水,再禁食至24 h。末次给药后3 h,除正常组外,余对大鼠均行幽门结扎术。术后禁食禁水,所有动物24 h后处死,结扎幽门和贲门后取出胃。向胃内注入1%甲醛10 mL,再将胃浸泡于1%甲醛液中10 min。沿胃大弯剖开,观察溃疡情况,拍照记录,记录胃黏膜损伤长度,并以胃黏膜损伤长度总和为溃疡指数,损伤计数标准同上。 1.4统计学处理 结果以xˉ±sxˉ±s表示;组间计量资料差异比较采用t检验,以P0.05为有显著性差异。 2 结果 2.1 模型组和对照组的电泳模型 正常组小鼠胃黏膜光滑无任何损伤。模型组胃黏膜多处可见充血水肿,广泛分布条状溃疡和大量出血点。其中正常组胃溃疡指数0分,模型组(24.5±7.2)分,白芨多糖低剂量组(19.6±8.2)分,中剂量组(18.8±6.4)分,高剂量组(15.3±7.5)分。与模型组比较,白芨多糖低、中剂量组胃黏膜损伤减轻,但无显著性差异(P均0.05),而高剂量组同应激模型组比较有显著性差异(P0.05)。 2.2 模型大鼠输注后白多糖低剂量模型的建立 正常组小鼠胃黏膜光滑无任何损伤。模型组胃黏膜多处可见充血水肿,广泛分布条出血点。其中正常组胃溃疡指数0分,模型组(25.6±9.2)分,白芨多糖低剂量组(23.5±9.1)分,中剂量组(20.1±7.7)分,高剂量组(15.5±7.4)分。白芨多糖低剂量组的胃溃疡指数略低于对照组但无显著性差异,而白芨多糖中、高剂量组同诱导模型组比