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氮素对漂浮育苗烟苗蛋白质组分含量、硝酸还原酶活性和干质量积累的影响
氮素与烟田的生长密切相关。只有在适当的氮素供应条件下,烟株才能正常生长,高质量的叶子才能生产出化学成分协调的优质卷烟。漂浮育苗是通过基质的毛细血管作用吸收供给烟苗生长所需的生长、营养和成分,达到苗壮、苗齐、无病虫等目的。因此,合理的施肥水平是培育壮苗的重要因素。无磷或前期缺磷会严重影响烟苗的生长发育,K2O为50~100 mg/L对漂浮烟苗的生长发育最为有利。蛋白质是氮素代谢的主要产物,蛋白质分可溶性蛋白质(仅由氨基酸组成)和复合蛋白质两大类,前者根据它们在不同溶剂——水、稀盐、醇、稀酸或稀碱中的溶解性又分成不同的类别。分析不同蛋白质组分可在生物化学水平上说明烟株生长发育的内在规律。为此,研究了氮素供应水平对漂浮烟苗生长发育过程中蛋白质组分含量变化、硝酸还原酶活性和叶、根干质量积累的影响进行了研究,旨在进一步探讨采用漂浮育苗方式育苗时氮素对烟苗生长发育的影响,为寻求烤烟漂浮育苗最佳氮素营养水平提供理论依据。
1 材料和方法
1.1 不同处理的珍珠岩浮盘与播种
试验选用烤烟K326包衣种进行漂浮育苗,于2006年3~5月在河南农业大学科教园区网室内进行。浮盘、育苗肥料和育苗基质均由叶县漂浮育苗材料厂提供。基质由草炭、蛭石、膨化珍珠岩混合而成。浮盘规格为68 cm×34 cm,采用聚氯乙烯无滴膜,苗池高度15 cm,水深约10 cm,底部铺2层聚乙烯黑色塑料薄膜。
试验设3个处理:N0,N1和 N2,3次重复。播种时N0,N1和N2氮浓度分别为0,100和200 mg/L(以氮含量计算);播种后30 d加1次营养液,氮浓度分别为100,100和200 mg/L。磷、钾浓度保持一致,分别为50 mg/L(以P2O5计)和100 mg/L(以K2O计)。N,P,K由NH4NO3,KH2PO4,K2SO4提供,所用试剂均为分析纯。
1.2 蛋白组分的检测
分别于播种后35,42,49,56 d 8:30~9:30选生长均匀一致的健壮烟苗取其功能叶,去除主脉后测定蛋白组分,包括水溶蛋白、盐溶蛋白、醇溶蛋白和碱溶蛋白的含量及硝酸还原酶活性;取均匀一致的烟苗若干株分出根系和叶片,烘干称重,测定其干质量。蛋白组分进行分步提取,采用考马斯亮蓝G250比色法测定;硝酸还原酶活性测定采用活体法。
2 结果与分析
2.1 溶蛋白和碱溶蛋白
在蛋白组分中,水溶蛋白和盐溶蛋白属代谢蛋白,而醇溶蛋白和碱溶蛋白属贮藏蛋白。播种后35~56 d仅测出水溶蛋白、醇溶蛋白和碱溶蛋白,盐溶蛋白未测出,可能是因为烟叶中不含盐溶蛋白或者其含量较低。
2.1.1 个处理水溶蛋白的含量
水溶蛋白又称白蛋白,主要以参与代谢活动的酶类形式存在。由图1看出,整个苗期,N1和N2 2个处理水溶蛋白含量变化趋势一致,均在播种后42 d出现一峰值,随后蛋白含量有所下降,至播种后49 d又开始缓慢上升。而N0处理水溶蛋白含量一直呈现缓慢上升趋势。整个苗期,N1处理水溶蛋白含量除播种后42 d左右外均高于N2处理,除播种后56 d左右外均高于N0处理。
2.1.2 醇溶蛋白检测
由图2可知,播种后35~56 d,各处理醇溶蛋白含量变化趋势一致,成单峰曲线,且峰值均出现在播种后49 d。但是,整个苗期各处理间醇溶蛋白含量变化无一定的规律性。
2.1.3 碱溶蛋白检测结果
由图3可知,播种后35 d,N2处理碱溶蛋白可以测出但含量较低,而N0和N1处理碱溶蛋白未测出,可能是含量更低的缘故。播种42 d后,N0和N1碱溶蛋白含量变化均呈上升趋势。整个苗期,N2处理碱溶蛋白含量呈现出“先升后降”的变化趋势,峰值出现在播种后49 d。播种42~56 d后,不同处理碱溶蛋白含量均表现为N2N1N0。
2.1.4 n0总可溶性蛋白含量
由图4可看出,播种后35~56 d,各处理总可溶蛋白含量与水溶蛋白含量变化趋势完全一致。而整个苗期,N0总可溶蛋白含量一直低于N1处理,这是与水溶蛋白含量变化不一致的地方。相关分析表明,水溶蛋白和总可溶蛋白含量极显著相关,相关系数为0.915,但水溶蛋白含量仅占总可溶蛋白含量的55.6%~79.6%。
2.2 直气溶剂对还原酶活性的影响
硝酸还原酶是氮代谢过程中的关键酶,可以用硝酸还原酶活性作为衡量氮代谢强度的指标。由图5可知,播种后35~56 d,各处理硝酸还原酶活性均表现出先升后降的趋势,于播种后49 d达到最大值。整个苗期,N2处理硝酸还原酶活性均低于N1处理,说明氮素浓度过大反而降低烤烟叶片硝酸还原酶活性;而N0处理硝酸还原酶活性在前期(播种后42 d以前)和成苗时均低于N1处理,表明在前期氮素胁迫下,尽管中期烟苗的硝酸还原酶活性较高,但前、后期烟苗的硝酸还原酶活性均较低,不利于烟苗的氮素代谢,进
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