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枳实消痞丸对功能性消化不良小鼠胃转移的影响 李东元的《兰室秘方》。最初的处方是由于脾胃虚弱和冷热交换引起的心下恶行。现代多有报道用其治疗功能性消化不良 (Functional Dyspepsia, FD) , 取得满意效果。本实验通过观察其对小鼠胃排空、肠推进的影响, 及对大鼠胃酸、胃蛋白酶分泌的影响, 来探讨其治疗 FD 的作用机制。 1 材料表面 1.1 药材、加蒸馏稀释 枳实消痞丸原方水煎液, 常规煎煮 2 次, 水液浓缩成 200%, 置 4℃ 冰箱中备用, 用前根据需要用蒸馏水稀释, 药材购自广州中医药大学附一院, 经中药鉴定教研室鉴定;吗叮啉, 西安杨森制药有限公司出品, 批号 9701121;补中益气丸, 广东华天宝药厂生产, 批号 970323, 用前根据所需剂量, 加蒸馏水研磨稀释而成;肾上腺素, 武汉制药厂生产, 批号 971104。 1.2 动物 SD 系大鼠 (合格证号:97 A 12) , NIH 系小鼠 (合格证号:97 A 11) , 均由广东省卫生厅医用实验动场提供。 1.3 ld-2a与丙心酸质量机 722 型分光光度计, 上海第三分析仪器厂;LD-2 A 离心机, 北京医用离心机厂;PYX-DHS-3540 型隔水式电热恒温箱, 上海前进医疗器械一厂。 1.4 试剂 阿尔新蓝, 上海化学试剂站分装厂提供, 批号 85-06-17;酚红, 蚌埠化学试剂厂生产, 批号 9700131。 2 方法和结果 2.1 胃酚红残留率测定 取小鼠 40 只, 雌雄兼用, 体重 18~20 g, 随机分为 4 组, 分组及给药见表 1, 灌胃给药, 体积均为 25 mL/kg, 每日 1 次, 连续 3 d, 末次给药前禁食 12 h, 给药后 2 h 灌胃 0.04% 酚红溶液 (含水 1.5% 羧甲基纤维素) 0.25 mL, 20 min 处死动物, 同时取出胃及小肠, 将小肠平铺于白纸上。胃置于 30 mL 0.5 mol/L 的 NaOH 溶液中, 沿胃大弯剪开胃, 充分洗下胃内容物, 取 5 mL 离心 (3000 r/min, 10 min) 取上清液用 722 分光光度计于 560 mm 比色测其吸光度, 然后计算胃酚红残留率, 以胃酚红残留率为指标评价胃排空速度, 小肠推进率则以酚红在小肠中的移行距离占小肠全长的百分比来评价。结果见表 1。 2.2 对正常小鼠胃科学指标的影响 取小鼠 50 只, 体重 18~20 g, 雌雄兼用, 随机分为 5 组, 分组及给药见表 2。灌胃给药, 每日 1 次, 连续 3 d, 末次给药前禁食 12 h, 给药后 1.75 h, 除空白组外, 各组小鼠皮下注射肾上腺素 0.5 mg/kg, 15 min 后灌胃酚红溶液, 20 min 处死动?物, 以?后?步骤同实验 2.1。结果见表 2。 从表 1, 表 2 可以看出, 枳实消痞丸高、低剂量组对正常小鼠胃排空有明显促进作用, 与空白组相比, 有显著性差异 (P0.05~0.01) ;对肾上腺素负荷小鼠胃排空亦有促进作用, 与模型相比, 差异有显著性 (P0.05~0.01) , 两组实验对小鼠肠推进均无显著性影响 (P0.05) 2.3 胃蛋白酶活性测定 取体重 180~220 g 大鼠 40 只, 灌胃给药, 体积均为 1 mL/只, 每日 1 次, 连续 3 d, 末次给药前单笼禁食 36 h, 自由饮水, 给药后 2 h, 用乙醚轻度麻醉动物, 剪去腹部的毛, 常规消毒皮肤, 于剑突下沿腹白线开 1 个约长 2.5 cm 切口, 小心提起胃, 在幽门与十二指肠结合部用缝线结扎, 小心避开血管, 立即在十二指肠注入各药或蒸馏水 5 mL/kg。缝合后送回笼中, 禁食禁水, 5 min 后脱颈椎处死动物, 取出胃, 收集胃液于刻度离心管, 同时沿胃大弯剪开胃, 滤纸轻轻擦去胃壁上的杂物, 将胃泡入配好的阿尔新蓝溶液中, 将收集在离心管中的胃液以 3000 r/min 离心 15 min, 吸取上清液, 用 0.02 mmol/L NaOH 来测定游离酸及总酸排出量, 按文献法测定胃蛋白酶活性, 结果见表 3。 由上表可看出, 枳实消痞丸高、低剂量组能够降低游离酸、总酸度及胃蛋白酶活性, 与空白组相比有显著性差异 (P0.05~0.01) , 说明该方对大鼠胃酸、胃蛋白酶呈抑制性影响。 3 讨论 3.1 效果及病理生理 胃排空是胃内容物经幽门排入十二指肠的过程。约 40~50% 的 FD 患者的胃排空比健康对照者明显减缓, 表现为胃液体和固体或混合食物的胃排空延缓, 而促动力剂能改善症状, 促进胃排空, 说明胃动力减弱是 FD 的主要病理生理。本研究中, 枳实消痞丸可以明显加快胃排空, 对肾上腺素所负