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从酵母细胞中分离纯化醇脱氢酶柳畅先，吴士筠，胡卫钊（中南民族大学化学与生命科学学院，武汉，430074） 摘要：本文报道了从酵母细胞中提取醇脱氢酶，并进一步纯化的过程。采用硫酸铵分级沉淀，SephadexG-100葡聚糖凝胶层析，DEAE-cellulose离子交换层析技术。收得率为2.5%，纯化倍数为26.2。 关键词：醇脱氢酶；分离纯化；酵母菌中图分类号：0658 醇脱氢酶（ADH）除了在食品等工业中的作用之外，其在科学研究和分析测定中也具有重要价值，是酶法测定乙醇或乙醛含量的工具酶。沉淀法和层析法至今仍是广泛采用的分离蛋白质和酶的重要手段［1］。国内外在这方面的研究从20世纪70年代以来有很大进展，各种类型的层析技术用于生物大分子的分离，并得到迅速发展。用离子交换层析、亲和层析等方法分离纯化ADH和其它蛋白质［2?5］，经过4?5个纯化步骤后，纯化倍数可达100多倍。我国在酶的分离纯化技术上，酶制品的活性程度上，与国际先进水平相比还有较大的差距。所以对于酶分离纯化技术的研究，具有重要的意义。我们从酵母细胞中分离出醇脱氢酶，并通过硫酸铵分段盐析、凝胶层析以及离子交换层析对该酶进行纯化，用较少的步骤得到了相对高的纯化倍数。 1实验部分1.1仪器、试剂、菌种及培养基 HYA型恒温摇床；LRH-250-G型光照培养箱；GL-20B型高速冷冻离心机（中国科学院武汉科学仪器厂）；78-