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大花黄牡丹种子休眠解除效应研究 大花黄牡丹是牡丹科的一种多年生灌木。它是中国西藏的一种独特药物和观赏植物（乔恩，1997），被《中国物种红色名单》（第一卷）选为最危险的物种（王松等，2004）。种子繁殖是大花黄牡丹的唯一繁殖途径(成仿云等,1997;邢震等,2007)。在自然条件下,结实植株仅20%左右,生根成活率仅10%左右,且幼苗死亡率极高,天然更新的巨大障碍是造成大花黄牡丹极危的重要因素之一(杨小林等,2006;2007;张蕾,2008;赵仕虎等,2007;周生军等,2009)。因此,对大花黄牡丹种子萌发特性进行研究具重要意义,而国内外对此研究极少。 牡丹组植物种子具休眠特性,包括上胚轴及下胚轴休眠,且上胚轴休眠更为突出(刘心民等,2005;曾端香等,2000)。周仁超等(2002)对牡丹种子休眠解除的研究表明:不同种类种子休眠解除所需条件不同,如500 mg·L-1赤霉素(GA3)处理能显著加快紫斑牡丹(Paeonia rockii)生根速度,提高生根率,但200 mg·L-1以下GA3处理已生根种子却不能打破其上胚轴休眠;相反,包括GA3在内的各种理化处理均不能使栽培牡丹(Paeonia suffruticosa)种子提早萌发,但以100 mg·L-1GA3处理根长3 cm以上的生根种子却能打破上胚轴休眠(景新明等,1995);对滇牡丹(Paeonia delavayi)的研究结果表明:以200 mg·L-1GA3溶液浸泡24 h、挫伤种脐处种皮和50℃温水浸种3种处理方法对胚根的生长都有促进作用,GA3溶液浸泡也能打破上胚轴休眠(娄方芳等,2007)。 对大花黄牡丹种子萌发特性的研究仅见赵仕虎等(2007)的报道。该研究采用随采随播方式,于8月采种后以GA3、乙醇、机械破皮、沙藏处理后直接播种于大田,以不作处理为对照,种子于第2年3月开始出苗,所有处理从出苗开始至出苗结束历时16~25天,整个过程历时7个月左右,以GA3500mg·L-1处理后播种的效果最好,出苗率达91%,而对照出苗率也达77%。这与其他牡丹上胚轴有较长时间休眠有较大差异,且该研究未对播种后下胚轴萌生时间进行观察,也未对上胚轴休眠解除条件进行试验。 本文以自然风干3个月的大花黄牡丹饱满种子为材料,对其种子萌发特性及不同处理的休眠解除进行了系统研究,旨在为进一步揭示大花黄牡丹种子休眠机制提供更多理论依据,为大花黄牡丹的保护及规模化高效快捷育苗提供技术支撑。 1 材料和方法 1.1 材料表面 大花黄牡丹种子2008年9月采自西藏灵芝县、米林县,采后晾干混装于布袋,室内保存,12月底寄达昆明时种子含水量11.2%。 1.2 方法 1.2.1 预处理处理与发根 1)常规播种:将种子直播于昆明市中国林业科学研究院资源昆虫研究所露地苗床,基质为红壤土、河沙、农家肥按1∶1∶1比例配制。基质随时保持湿润,冬季不采取加温措施。条播,播种深度5 cm,条距20 cm,粒距5 cm。3个小区,每小区100粒。 2)温度对下胚轴休眠解除效应:设置5个温度处理,即5,10,15,20,25℃,置于人工气候箱中恒温培养。 3)预处理对下胚轴休眠解除效应:共8个处理,即50℃温水(1)、乙烯利20 mg·L-1(2)、乙烯利50 mg·L-1(3)、乙烯利80 mg·L-1(4)、GA3200mg·L-1(5)、GA3400 mg·L-1(6)、GA3600 mg·L-1(7),以室温清水(8)为对照。以上处理浸泡时间均为24 h,处理后均置于15℃人工气候箱中恒温培养。 各处理种子均用高压灭菌的河沙进行层积,培养期间保持沙子湿润。播种20天后,每天观察发根情况,以胚根伸出种皮3 mm视为种子发根。对发根起始天数、发根历期、发根率、发根指数等进行调查及统计。 发根起始天数:指从播种到第1粒种子发根所需天数。 发根历期:发根高峰后连续15天不再有发根种子出现则终止调查,以第1粒种子发根至统计期间最后1粒种子发根所经历时间为发根历期。 式中:Gt:置床后t日的发根数;Dt:相应的发根日数。 1.2.2 数据处理与统计方法 1)上胚轴休眠解除适宜处理时期:选择根长3,2~3,1~2,1 cm的种子用GA3200 mg·L-1浸泡2 h,15℃人工气候箱发芽。 2)温度对上胚轴休眠解除的影响:用GA3200 mg·L-1浸泡根长3 cm的种子2 h,于10,15,20,25℃的人工气候箱中发芽。 3)GA3对上胚轴休眠解除的影响:用50,100,200,300,400 mg·L-1的GA3浸泡根长3 cm的种子2 h,以室温清水浸泡2 h为对照,处理后置于15℃人工气候箱发芽。 4)低温处理对上胚轴休眠解除的影响:根长3 cm的种子4℃处理20,30,40天,处理后置于15℃人工