表面微生物监测操作.docx

表面微生物监测操作 目的 规范洁净室（区）的表面微生物监测操作，使其符合GMP的要求。 范围 本规程适用于公司内除动物室之外所有洁净室（区）表面微生物的监测工作，包括人员表面微生物和设备表面微生物等。 定义 洁净室（区）：对尘粒及微生物污染规定需进行环境控制的房间或区域。其建筑结构、装备及其使用均具有减少对该区域内污染源的介入、产生和滞留功能。 菌落：细菌培养后，由一个或几个细菌繁殖而形成的细菌集落，简称CFU，通常用个数表示。 静态测试：洁净室（区）净化空气调节设施及功能齐备，工艺设备已安装并可运行，洁净室（区）内没有生产人员的情况下进行的测试。 动态测试：洁净室（区）已处于正常生产状态下，人员进行正常操作时进行的测试。 职责 质保科QA：负责本规程的起草、修订、审核、培训、实施和监督。 质量授权人、质控科、生产部：负责本规程的审核。 质量部经理：负责本规程的批准。 相关部门及人员严格按照本规程执行。 引用标准 《医药工业洁净室（区）悬浮粒子的测试方法》GB/T16292-2010 《药品生产质量管理规范（2010修订）》附录1无菌药品 《中华人民共和国药典》2010年版二部 材料 大豆酪蛋白琼脂培养基接触碟（直径为55mm）、记号笔、恒温培养箱。 流程图 无 程序 监测准备 进行监测前到质量控制部化验室领取准备好足够数量的接触碟。使用前应仔细检查每个接触碟的质量，接触碟有变质、破损或污染的不能使用。 监测人员要按照洁净区更衣程序进入洁净区，监测用材料按《物料、物品进出洁净区操作YH》进行清洁、消毒处理后传递进入洁净区。 监测条件 确认恒温培养箱经过校验并且有校验合格证书在校验有效期内。 确认洁净室(区)内温湿度、压差符合要求。 单向流，测试应在净化空气调节系统正常运行时间不少于10min开始；对于非单向流，测试应在净化空气调节系统正常运行时间不少于30min开始。 监测标准 各洁净级别区域内表面微生物监测标准，见表1。 表1：表面微生物监测标准 洁净度 级别 接触（?55mm cfu/碟 警戒 限度 纠偏 限度 5指手套 cfu/手套 警戒 限度 纠偏 限度 A级 1 — — 1 — — B级 5 2 3 5 2 3 C级 25 12 17 — — — D级 50 25 35 — — — 注： 警戒限度为超出国家标准的70%（微生物项目为50%），如超出警戒限度时，需对该条件进行评估，必要时需增加检测频率或检测项目，以确保其能保持该级别环境。 纠偏限度为超出国家标准的90%（微生物项目为70%），如超过纠偏限度时，需对该级别条件下活动进行限制，并通知相关部门对该级别进行维修或更换，同时进行偏差处理。 监测范围及周期 区域及设备表面微生物：对生产过程中的种子液制备工序、原液制备工序、半成品配制工序、灌封工序的A、B级区域及区域内的设备，在关键操作完成后进行监测，每批次一次。C级、D级每月一次。 人员表面微生物：种子液制备工序、原液制备工序在A级下操作的人员，按A级标准判定结果，每批次监测一次。半成品配制工序、灌封工序B级区的操作人员，在生产操作结束后进行监测，按B级标准判定结果，每批次一次。 人员手指菌：在A级区域下操作的人员，按A级标准判定结果，每批次监测一次。操作人员每次打开隔离器在A级下进行操作，则需在操作前后监测手指菌按A级标准判定结果。B级区操作人员在生产操作结束后进行手指菌监测，按B级标准判定结果。 采样点设置 采样要有代表性，能够真实反映环境的实际情况。 对区域及设备表面微生物的采样点布置根据风险可在关键设备或关键工作活动范围处设置主要控制采样点。 人员采样点应都在身体的正面（迎风面），应加强双手的取样和手腕、口罩的取样。 监测方法 监测要求 用接触碟采样时，接触面积应约为25cm2 手指菌的采样 采样时，将接触碟开启，被检查人员用一只手的五指在接触碟上按指印（注意不要将培养基压破），然后迅速盖上接触碟盖子在接触碟盖子上标清接触碟编码（编码方法见《环境监测管理YH》）及日期；另一只手的五指在另一接触碟上按压指印，操作同上。采样结束后被检查人员要用75%乙醇擦洗手指以去除残留琼脂。 洁净服表面采样 采样时，将接触碟开启，接触碟与被检查人员的洁净服的手腕、肘、口罩、衣襟处在平皿上接触不少于10s，向整个接触表面施加恒定均匀的压力轻压（注意不要将培养基压破），采样后在接触碟盖上标清接触碟编码及日期。采样结束后被检查人员要用75%乙醇擦拭取样表面以去除残留琼脂。 设备表面采样 取样监测采用接触碟法。采样时，将直径是55mm的接触碟开启，使培养基表面与取样面直接接触，均匀按压接触碟底板（注意不要将培养基压破），确保全部琼脂表面与取样点表面均匀接触10s左右，再盖上碟盖，在接触碟盖上标清接触碟编码及日期。取样后，需