制药厂沉降菌监测操作.docx

沉降菌监测操作 目的 规范洁净室（区）沉降菌监测的标准操作，使其检测规范化，符合GMP的要求。 范围 本规程适用于公司内除动物室之外所有洁净室（区）沉降菌的监测工作。 定义 洁净室（区）：对尘粒及微生物污染规定需进行环境控制的房间或区域。其建筑结构、装备及其使用均具有减少对该区域内污染源的介入、产生和滞留功能。 沉降菌：用《医药工业洁净室（区）沉降菌的测试方法》GB/T16294-2010提及的方法收集到的活微生物粒子，通过专用的培养基，在适宜的生长条件下繁殖到可见的菌落数。 沉降菌菌落数：规定时间内每个培养皿收集到空气中沉降菌的数目，以个/皿表示。 静态测试：洁净室（区）净化空气调节设施及功能齐备，工艺设备已安装并可运行，洁净室（区）内没有生产人员的情况下进行的测试。 动态测试：洁净室（区）已处于正常生产状态下，人员进行正常操作时进行的测试。 职责 质保科QA：负责本规程的起草、修订、审核、培训、实施和监督。 质量授权人、质控科、生产部：负责本规程的审核。 质量部经理：负责本规程的批准。 相关部门及人员严格按照本规程执行。 引用标准 《医药工业洁净室（区）沉降菌的测试方法》GB/T16294-2010 《药品生产质量管理规范（2010修订）》附录1无菌药品 《药品GMP指南》2010年版 《中华人民共和国药典》2010年版二部 材料 大豆酪蛋白琼脂培养基（TSA）培养皿(培养皿规格φ90mm)、沙氏培养基（SDA）培养皿(培养皿规格φ90mm)、记号笔、恒温培养箱。 流程图 无 程序 监测准备 进行监测前到质控科化验室领取准备好足够数量的TSA培养皿（或SDA培养皿）。使用前应仔细检查每个培养皿的质量，培养皿有变质、破损或污染的不能使用。 监测人员要按照洁净区更衣程序进入洁净区，监测用仪器材料按《物料、物品进出洁净区操作YH》进行清洁、消毒处理后传递进入洁净区。 监测条件 确认恒温培养箱经过校验并且有校验合格证书在校验有效期内。 确认洁净室(区)内温湿度、压差符合要求； 确认静态沉降菌测试前被测试洁净室（区）已经过清洁消毒； 确认监测时间，对于单向流，测试应在净化空气调节系统正常运行时间不少于10min开始；对于非单向流，测试应在净化空气调节系统正常运行时间不少于30min开始。 动态测试前自净15min～20min(与生产操作同步实施)。 监测标准 洁净区沉降菌动态监测标准见下表1、静态监测标准见下表2。 表1：沉降菌动态监测标准 洁净度级别 沉降菌（φ90mm） cfu/4h 警戒限度 纠偏限度 A级 1 — — B级 5 2 3 C级 50 25 35 D级 100 50 70 注：单个沉降碟的暴露时间可以少于4h，同一位置可以使用多个沉降碟连续进行监测并累积计数。 表2：沉降菌静态监测标准 洁净度级别 沉降菌（φ90mm） cfu/0.5h 警戒限度 纠偏限度 A级 1 — — B级 1 — — C级 3 1 2 D级 10 5 7 注： 警戒限度为超出国家标准的70%（微生物项目为50%），如超出警戒限度时，需对该条件进行评估，必要时需增加检测频率或检测项目，以确保其能保持该级别环境。 纠偏限度为超出国家标准的90%（微生物项目为70%），如超过纠偏限度时，需对该级别条件下活动进行限制，并通知相关部门对该级别进行维修或更换，同时进行偏差处理。 真菌监测标准：洁净区内真菌不得检出。 监测范围及周期 动态监测 A级：每批次一次； B级：每批次一次； 监测点：质量控制部化验室无菌检查操作；菌液制备工序、原液制备工序、半成品稀配工序、灌装半加塞工序及轧盖工序的A级、B级区域进行全程动态监测。 使用TSA培养皿，每批次一次，每半年增加使用SDA培养皿进行一次沉降菌真菌的检测。 静态监测 A级：每月一次； B级：每月一次； C级：每月一次； D级：每月一次 每月监测采样TSA培养皿，每半年增加使用SDA培养皿进行一次沉降菌真菌的检测。 采样要求 采样点设置及采样要求 采样要有代表性，能够真实反映环境的实际情况。 工作区的采样点位置离地0.8m～1.5m左右；可在关键设备或关键工作活动范围处增加采样点。 采样点应避开尘粒较集中的回风口。 采样时，监测人员应站在采样口的下风侧，并尽量少走动。 应采取一切措施防止采样过程的污染和其他可能对样本的污染。 采样点设置 动态监测：在确定位置时应依据生产操作的内容及关键程度进行风险评估，并依据评估结果制定“定置图”。 静态监测：在洁净区内均匀布置。 静态测试采样点的确定在满足最少采样点数的同时，还应满足最少培养皿数。 最少采样点数目，见表3。 表3：最少采样点数 面积（M2 洁净级别 A级 B级 C级 D级 10 2～3 2 2 2 10～20 4 2 2 2 20～40 8 2 2