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基于x射线粉末衍射技术的替勃龙晶型定量分析 青霉素是一种具有弱雌激素、妊娠酶活性和雄激素活性的药物。化学名称为（7，17）-17-硝基-7-甲基-19-脱甲基-17-5（10）-烷基-20-烷-3-酮，化合物为c1i-28o2，剂量为312.45，样品为1629169。替勃龙存在多晶型现象, 从稳定性方面考虑Ⅰ晶型属于热力学最稳定的晶型, 为目标晶型, Ⅱ晶型为亚稳晶型。在药物制剂过程中, 需对晶体进行微粉化, 以减小药物粒径, 使其充分混合, 促进溶解吸收。但是研磨会促使大多数的有机药物发生固相转晶。Otsuka, Makoto等发现, 头孢菌素、氯霉素棕榈酸酯及消炎痛在研磨过程中均会发生晶型转变。研磨也会加速甲氰咪胍的多晶型转化。在研究研磨对药物晶型的影响时, 往往结合温度、湿度、时间等因子综合考虑。例如消炎痛在玛瑙离心研磨机里进行研磨, 4℃时, α和γ晶型研磨后得到的均为非晶型;30℃时, γ晶型研磨后得到α晶型, 而α晶型研磨后却比较稳定。一般而言, 研磨往往会导致亚稳晶型向稳定晶型的转变, 但也有例外。X射线粉末衍射是常用的研究和区分不同晶型的有效方法, 该方法不仅可用于晶型的定性区分, 在建立特征峰与不同晶型的定量关系后, 还可用于不同晶型比例的定量控制。墨玉欣等利用X射线粉末衍射仪对L-谷氨酸多晶型混合物进行定量分析, 将α晶型特征峰强度比Rα与α晶型在混合物中的含量线性回归得到标准曲线Rα=0.9552Xα+0.0145, R2=0.9865。X射线粉末衍射前的制样过程需对晶体进行研磨, 要求研磨后的样品发生少量或不转晶并且是十分细小的粉末颗粒, 使试样在受光照的体积中有足够多数目的晶粒, 以获得正确的衍射图谱。但目前在利用X射线粉末衍射进行晶型定量分析的研究中缺少对制样过程中研磨方式的探究。因此本文就研磨对替勃龙晶体转晶过程的影响进行了研究与探讨, 选取最优的研磨方式进行制样并建立了用于Ⅰ晶型定量分析的标准曲线, 为计算替勃龙产品中稳定晶型的百分含量提供了理论基础。 1 试验部分 1.1 升温范围及速率 差示扫描量热分析:采用DSC 204/1/G Phoenix型差示扫描量热分析仪, Al坩埚, 升温范围为20~190℃, 升温速率为10℃/min, 气氛为氮气。X射线粉末衍射表征:采用D/MAX 2550 VB/PC型转靶X射线衍射仪, Cu Kα1辐射, 管压40k V, 管流40m A, 石墨单色器, 2θ扫描范围为5°~65°, 扫描速度为4°/min, 步长为0.02°。 1.2 量替勃龙单晶的制备 本试验采用培养单晶的方法制备Ⅰ晶型、Ⅱ晶型替勃龙晶体。 Ⅰ晶型:室温下取少量替勃龙原料溶于无水乙醇中, 利用微孔膜过滤器滤去溶液中少量的不溶物, 将配置好的饱和溶液置于带塞子的玻璃容器中, 调节容器的密封程度, 使溶液缓慢蒸发, 7d后可得单晶。 Ⅱ晶型:溶剂为甲苯, 制备方法与Ⅰ晶型相同。 1.3 酶系统优化 本试验采用了两种研磨方式进行研究, 分别为玛瑙研钵研磨与陶瓷研钵研磨。 研磨条件:温度为20℃, 湿度为32%。 玛瑙研钵研磨:将待测样品置于玛瑙研钵中, 对试样进行顺时针轻微研磨, 研磨速度为30r/min。 陶瓷研钵研磨:将待测样品置于陶瓷研钵中, 对试样进行顺时针轻微研磨, 研磨速度为30r/min。 1.4 研钵、陶瓷研钵研磨 称取替勃龙Ⅰ晶型1.5g。分别用玛瑙研钵、陶瓷研钵研磨1、6和9min。每次研磨过后取样约0.5g进行差式量热扫描和X射线粉末衍射分析。 1.5 x-射线衍射分析 称取一定质量的替勃龙Ⅰ晶型。用以上两种研磨方式对其进行研磨, 每次研磨过后取样约0.5g进行差式量热扫描及粉末X射线衍射分析。试验内容如表1所示。 1.6 pxrd分析 准确称量Ⅰ晶型与Ⅱ晶型产品, 配置Ⅰ晶型质量分数分别为10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%和90%的标准样品。采用陶瓷研钵进行顺时针轻微研磨2min, 研磨速度为30r/min, 并用药匙均匀混合10min。将混合均匀的样品进行X射线粉末衍射, 得到PXRD图谱。为了使标准曲线更精确, 每组样品测量5次, 衍射角及特征峰强度均取5组数据的平均值。再将Ⅰ晶型的百分含量与特征峰强度比进行拟合得到标准曲线。 2 结果与讨论 2.1 实验室条件下制备的晶型pxrd图谱 运用jade5.0软件调用替勃龙Ⅰ晶型与Ⅱ晶型的标准图谱, 与实验室条件下制备的Ⅰ晶型与Ⅱ晶型进行对比, 如图1所示。本试验制备的Ⅰ晶型与Ⅱ晶型的PXRD图谱与标准图谱基本一致。因此Ⅰ晶型与Ⅱ晶型具有较高的纯度。 实验室条件下制备的Ⅰ晶型与Ⅱ晶型PXRD图谱如图2所示。对比两种晶型的PXRD图谱, 选取特征峰。Ⅰ晶型特征峰衍射角为13.64°, Ⅱ