20140716_生物标志物与分子检测平台服务 预览.pptxVIP

2014年中培训 生物标志物与分子检测服务;工作目标，多样的技术，灵活选择和组合，实现不同的目标;生物标志物与分子检测平台服务项目;技术功能 技术方法：Sanger 或 Pyrosequencing测序 应用 基因的cDNA测序 肿瘤医院合作遗传性乳腺癌相关基因测序，寻找突变 甲基化位点检测菌种鉴定等等;荧光定量PCR技术;在PCR反应中加入荧光基团，利用荧光信号累积实时检测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。;Real-time PCR用途;荧光定量PCR实验基本流程;荧光定量PCR-两种荧光原理;荧光定量PCR的化学原理——SYBR Green;荧光定量PCR的化学原理——SYBR Green;荧光染料法的特点及应用 、能够与所有的核酸双链结合，受激后产生荧光，其荧光的强度与双链核酸的含量及长度成正比，因此本底较高； 、可做双链核酸的熔解曲线分析； 、SYBR GreenⅠ染料本身价格便宜，但是做荧光定量PCR时对引物设计的要求很高；否则引物二聚体及非特异性扩增会严重干扰结果的准确性，尤其是模板含量较低时； 、适合于基因含量及基因表达变化的粗略分析或初筛； 、在分析的基因种类很多，但是样品量很少时，尤其适用。;Taqman探针类;7700: 6- 8 sec scan one plate 5700: 15 sec for one plate scan