二倍体光温敏核不死亡水稻的人工诱导.docxVIP

二倍体光温敏核不死亡水稻的人工诱导 在多倍性方面研究水稻产量是一个值得深入研究的新领域。我们在研究同源四倍体水稻的生殖特性时发现,籼、粳稻在二倍性水平上,其杂种第一代的结实率和籽粒充实度很难达到正常水平,而在四倍体水平上很容易达到正常水平,由此提出在同源四倍体水平利用亚种间强大的杂种优势的思路。根据两系法杂交稻的育种模式,是否能培育出具有实用价值的光温敏核不育水稻是其技术体系的关键。为此目标,我们已将一批二倍体光温敏核不育水稻人工诱导为同源四倍体光温敏核不育水稻。关于二倍体光温敏核不育水稻的光温生态生理学及其育性稳定性前人已进行过大量的研究,而当二倍体光温敏核不育水稻被诱导为同源四倍体光温敏核不育水稻后其育性稳定性和育性转换规律尚未见文献报道。本文以同源四倍体光温敏核不育水稻为材料,对其在不同光温条件下的育性稳定性和育性转换时间进行了研究,旨在为利用四倍体籼、粳稻亚种间强大的杂种优势提供一些参考资料。 1 设置温度、水质、仪器 研究材料包括3份四倍体光温敏核不育水稻品系[培矮64s(4)、99s(4)、7001s(4)] 、3份二倍体光温敏核不育水稻品系[培矮64s(2)、99s(2)、7001s(2)]、2份同源四倍体水稻品系[IR36(4)和IR28(4)]以及2份二倍体常规水稻品系(9311和G893)。 所有的实验材料于2002年3月20日播种,4月20日移栽至大田。每份材料种植500株,采用常规的田间管理。由于7001s(4)和7001s(2)具有比较强的感光性,因而从4叶期开始对其进行为期4周的遮光处理,以便促进其提早进行幼穗分化,使之能在夏季高温条件下抽穗开花。从7月20日开始对各份始穗的材料进行定点取穗,对其花粉粒育性进行鉴定,每隔5 d取材1次,从每份材料中每次镜检5穗,实验直至8月23日为止,由此确定各份材料在夏季高温条件下的育性变化状况。同时,对各始穗的材料进行定点套袋隔离,从每份材料中每次套袋隔离5穗,在20 d 后对其自交结实率进行统计。从9月20日开始至9月30日为止,每隔2 d取材1次,从每份材料中每次镜检5穗,由此确定各份材料在秋季低温条件下的育性变化状况。同时,对各始穗的材料进行定点套袋隔离,从每份材料中每次套袋隔离5穗,在20 d后对其自交结实率进行统计。在对实验结果进行统计时,所有已经发生子房膨大但充实度尚未达到正常水平的颖花均被视为结实颖花。 本实验的另一部分是利用人工气候箱 LRH-250-GS 对每份实验材料在不同温度条件下的育性特点和育性转换的临界温度进行鉴定。在人工气候箱内,每日的光照时间为13.5 h,光强为5 000 lx;温度设置为3个日平均温度,即22.0℃、22.5℃和23.5℃,在实验中采用变温处理,相应的温度变化幅度为18.0℃～24.5℃、18.5℃～25.0℃和19.5℃～26.0℃。当实验材料发育到花粉母细胞形成期至减数分裂期这段时期时对其进行人工变温处理。每一批材料在人工气候箱内连续处理6 d 后移至田间再让其进一步生长发育。随后,在抽穗期利用1.0 % KI-I2溶液对每份材料的花粉粒育性进行鉴定。从每份材料中每次镜检5穗,每穗取10朵颖花混合制片,在光学显微镜下每片取5个视野求平均数,由此统计花粉粒的染色率。同时,对始穗的各份材料进行定点套袋隔离,在20 d后对其自交结实率进行统计。鉴定标准同前。 2 结果和分析 2.1 同源四倍体水稻品系花粉粒染色率和自交实率 在夏季高温自然条件下所有的光温敏核不育水稻,无论是同源四倍体还是二倍体,均表现出稳定的雄性不育性,花粉粒的染色率和自交结实率均为0,不育株率和不育度均达到100%。但2份同源四倍体水稻品系的花粉粒染色率分别为46.8%和34.9%,自交结实率分别为14.4%和6.7%;2份二倍体常规水稻品系 (9311和G893) 的花粉粒染色率分别为88.2%和84.5%,自交结实率分别为86.1%和82.3%(表1)。 2.2 花粉的染色率和实物速率 在秋季低温自然条件下所有的光温敏核不育水稻,无论是同源四倍体还是二倍体,均表现出明显的育性转换特性。花药中的一些花粉粒呈现明显的染色反应,花粉可染率的变幅为31.4%～61.3%;稻穗中的部分颖花能结实,结实率的变幅为24.9%～55.2%,其充实度均达到正常水平。实验中还观察到,从9月5日开始,二倍体光温敏核不育水稻即出现被染色的花粉粒,而同源四倍体核不育水稻在9月14日后才镜检到染色的花粉粒,表明同源四倍体核不育水稻比二倍体核不育水稻发生育性转换的时间更晚,在雄配子或雄配子体的发育上前者对低温的反应似乎更迟钝(表1)。 2.3 发生育性稳定 在花粉母细胞形成期至减数分裂期进行3种人工变温处理后,2份同源四倍体水稻[IR36(4)和IR28(4)]和2份二