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发酵液的预处理;生物分离过程的一般流程;第二章 发酵液的预处理和 固液分离 第一讲;预处理和固液分离内容;;;为何要对发酵液进行预处理?;为何要对发酵液进行预处理?;预处理的目的;预处理的方法;一 凝聚和絮凝在发酵液预处理中的应用;凝聚和絮凝是两种方法,两个概念。 凝聚:指在投加的化学物质(铝、铁的盐类)作用下,胶体脱稳并使粒子相互聚集成1 mm 大小块状凝聚体的过程。 絮凝:指使用絮凝剂(天然的和合成的大分子量聚电解质)将胶体粒子交联成网,形成10mm大小絮凝团的过程。其中絮凝剂主要起架桥作用。;;发酵液中菌体表面带有负电荷,由于静电引力使溶液中反离子被吸附在其周围,在界面上形成了双电层。 正离子同时受到使它们均匀分布的热运动影响,具有离开胶粒表面的趋势。;;胶体双电层结构;ζ电位的计算: ;滑移面上的电位为ζ,称ζ电位(电动电位)。 目前生物工业中常用的助滤剂是硅藻土,其次是珍珠岩粉、活性炭、石英砂、石棉粉、纤维素、白土等。 絮凝剂的浓度,最佳用量为粒子表面积约有一 半被聚合物覆盖; δ— 扩散层的有效厚度,即为吸附层和扩散层界面处电位φd降低到其值为1/e处的距离,不能直接测定. 2、微生物絮凝剂或将大部分替代普通絮凝剂 角度越小,颗粒沉降距离短,沉降速度快,但分离效果差。 对于胞外产物,可先将菌体或其他悬浮杂质去处,才能从澄清的滤液中提取代谢产物。 滤浆filter pulp : 所处理的悬浮液; 高分子絮凝剂的吸附架桥作用 悬浮液自身压强差、重力 发酵液中菌体表面带有负电荷,由于静电引力使溶液中反离子被吸附在其周围,在界面上形成了双电层。 存在一定的毒性,特别是阳离子型聚丙烯酰胺,用于食品和医药工业时应谨慎。;双电层与凝聚;凝聚价或凝聚值 ;Schulze-Hardy法则:反离子的价数越高,凝聚价越小,即凝聚能力越强。 阳离子对带负电荷的胶粒凝聚能力受化合价、水化半径、离子运动能力的影响,次序为 ;;;絮凝剂是一种能溶于水的高分子聚合物,其相对分子质量可高达数万至一千万以上,长链状结构,其链节上含有许多活性官能团,包括离子基团以及非离子型基???。 它们通过静电引力、范德华引力或氢键的作用,强烈地吸附在胶粒的表面。 当一个高分子聚合物的许多链节分别吸附在不同的胶粒表面上,产生架桥联结时,就形成较大絮团,产生絮凝作用。 ;高分子絮凝剂的吸附架桥作用 ;可分为三类:人工合成有机高分子聚合物、天然有机高分子聚合物、无机高分子聚合物 1)目前常用的是人工合成有机高分子聚合物,如聚丙烯酰胺类衍生物、聚乙烯亚胺衍生物;聚丙烯酸类和聚苯乙烯类衍生物。; 高分子聚合物絮凝剂根据活性基团在水中解离情况不同,可分为三类:阴离子型(含有羧基)、阳离子型(含有胺基) 、非离子型;聚丙烯酰胺类絮凝剂的优点 用量少,一般以mg/L计量; 絮凝体粗大,分离效果好; 絮凝速度快; 种类多,适用范围广。;2)天然有机高分子絮凝剂;3)无机高分子聚合物;微生物絮凝剂;微生物絮凝剂;絮凝的影响因素;对于带负电荷的菌体或蛋白质来说,采用阳离子型高分子絮凝剂同时具有降低胶粒双电层电位和产生吸附桥架的双重机理,单独使用可达到较好絮凝效果; 对于非离子型和阴离子型高分子絮凝剂,要采用凝聚和絮凝双重机理才能提高过滤效果。 这种包括凝聚和絮凝机理的过程,称为混凝。;二 预处理-加热;二 预处理-加热;三 预处理-调节pH;;四 加入助滤剂(filter aids) ;发酵液中的杂质;(一)高价无机离子的去除方法;(二)杂蛋白的去除方法;;2.杂蛋白去除-变性 Denaturation ;2 变性;3.杂蛋白去除- 吸附法 adsorption;思考题;第二章 发酵液的预处理和固液分离 第二讲;2.2 发酵液的固液分离;一 影响发酵液固液分离的因素;2)发酵液的黏度viscosity : 固液分离速度通常与粘度成反比,粘度越大,固液分离越困难。;收集胞内产物的细胞或菌体,分离除去液相, 收集含生化物质的液相,分离除去固体悬浮物(细胞、菌体、细胞碎片、蛋白质的沉淀物和它们的絮凝体等)。;二 常见的固液分离方法;(一) 过 滤 filtration;滤饼过滤:;过滤推动力: 悬浮液自身压强差、重力 悬浮液的—外加压力 过滤介质的—抽真空 离心力 过滤阻力: 介质阻力:可视为平变,且一般过滤初较明显 滤饼阻力: 滤饼厚度:随过滤进行而增加 滤饼特性:颗粒形状、大小。 大多情况下,过滤阻力主要取决于滤饼阻力。;过滤速度的强化;2 过滤介质选择;(二)杂蛋白的去除方法 硫酸铝 Al2(SO4)3?18H2O(明矾); 发酵液中由于菌体自溶,核酸、蛋白质及其它有机粘性物质的存在也会影响固液分离。 3)真空转鼓过滤机(rotary-drum vacuum filt

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